人Th17细胞体外诱导分化条件的研究
本文关键词:人Th17细胞体外诱导分化条件的研究
【摘要】:通过密度梯度离心法从人新鲜血液中分离获得人外周血单核细胞(PBMCs),比较分析加入不同细胞极化因子(IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23)以及诱导不同时间(1,2,3,4 d)对Th17细胞分化的影响,利用流式细胞仪、ELISA方法以及Q-PCR技术考察相关指标,评估人体外Th17细胞的分化水平。研究表明,IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23单独均能对Th17细胞的分化起到促进作用,联用IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23时可使Th17细胞体外分化效率达到最佳。随着诱导时间的延长,Th17细胞分化水平逐渐升高,培养3 d时达到峰值,继续增加培养时间分化率反而出现降低。最终确立人Th17细胞体外分化的最佳诱导条件:在加入CD3抗体和CD28抗体的基础上,同时加入IL-1β、IL-6、TGF-β以及IL-23共同培养人PBMCs3 d可有效地刺激人Th17细胞的分化,并且流式细胞检测Th17细胞分化率达到近10%,ELISA检测细胞上清液中IL-17A含量达到近3 ng/m L,Q-PCR方法分析IL-17 mRNA基因表达升高达15倍,此方案具有操作简便、周期短、成本低廉等优点,为Th17细胞的功能研究及相关疾病治疗药物的研发建立了有效的检测平台。
【作者单位】: 中国药科大学生命科学与技术学院;
【关键词】: 人外周血单核细胞 Th细胞 体外 诱导分化
【基金】:国家自然科学基金资助项目(No.81202450,No.81273426) 国家教育部博士点基金资助项目(No.20120096110007) 江苏省高校研究生科技创新计划资助项目(No.CXZZ13_0331)~~
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 引用本文王辰,郭薇,王欣,等.人Th17细胞体外诱导分化条件的研究[J].中国药科大学学报,2016,47(1):106-111.Cite this article as:WANG Chen,GUO Wei,WANG Xin,et al.Condition of human Th17 cell differentiation induced in vitro[J].J China PharmUniv,2016,47(1):106-111.
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,本文编号:862910
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