人Th17细胞体外诱导分化条件的研究

发布时间：2017-09-16 12:02

  本文关键词：人Th17细胞体外诱导分化条件的研究

  更多相关文章： 人外周血单核细胞 Th细胞 体外 诱导分化

【摘要】：通过密度梯度离心法从人新鲜血液中分离获得人外周血单核细胞(PBMCs),比较分析加入不同细胞极化因子(IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23)以及诱导不同时间(1,2,3,4 d)对Th17细胞分化的影响,利用流式细胞仪、ELISA方法以及Q-PCR技术考察相关指标,评估人体外Th17细胞的分化水平。研究表明,IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23单独均能对Th17细胞的分化起到促进作用,联用IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23时可使Th17细胞体外分化效率达到最佳。随着诱导时间的延长,Th17细胞分化水平逐渐升高,培养3 d时达到峰值,继续增加培养时间分化率反而出现降低。最终确立人Th17细胞体外分化的最佳诱导条件:在加入CD3抗体和CD28抗体的基础上,同时加入IL-1β、IL-6、TGF-β以及IL-23共同培养人PBMCs3 d可有效地刺激人Th17细胞的分化,并且流式细胞检测Th17细胞分化率达到近10%,ELISA检测细胞上清液中IL-17A含量达到近3 ng/m L,Q-PCR方法分析IL-17 mRNA基因表达升高达15倍,此方案具有操作简便、周期短、成本低廉等优点,为Th17细胞的功能研究及相关疾病治疗药物的研发建立了有效的检测平台。
【作者单位】： 中国药科大学生命科学与技术学院;
【关键词】： 人外周血单核细胞 Th细胞 体外 诱导分化
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81202450,No.81273426) 国家教育部博士点基金资助项目(No.20120096110007) 江苏省高校研究生科技创新计划资助项目(No.CXZZ13_0331)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 引用本文王辰,郭薇,王欣,等.人Th17细胞体外诱导分化条件的研究[J].中国药科大学学报,2016,47(1):106-111.Cite this article as:WANG Chen,GUO Wei,WANG Xin,et al.Condition of human Th17 cell differentiation induced in vitro[J].J China PharmUniv,2016,47(1):106-111.

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 姜岩;2002年诺贝尔生理学或医学奖:打开人体细胞分化和演变的大门[J];国外科技动态;2002年11期

2 陈运贤,钟雪云,欧瑞明,陈惠珍,罗伟琼,钟立业,邢达,韩忠朝;CD34~+细胞的心肌细胞分化潜能研究[J];中国病理生理杂志;2002年02期

3 朱红琴;;周期蛋白依赖性激酶6与肿瘤和细胞分化[J];生命的化学;2009年01期

4 李建军;赵亚溥;;细胞铺展动力学的研究进展[J];力学学报;2012年05期

5 叶秀珍,朱德厚,陈瑞铭;脑垂体前叶细胞分化的超微结构观察[J];动物学研究;1982年S1期

6 陈素;李稻;;铁代谢与细胞分化[J];国际检验医学杂志;2008年12期

7 雷建章;;组织胚胎学讲座 第一讲 细胞——人体结构的基本单位[J];中国农村医学;1988年01期

8 史敏言;调节T细胞的辅助-抑制-反抑制系统[J];安徽医科大学学报;1989年04期

9 涂宣林;朱运松;;Arg-Gly-Asp三肽顺序在细胞粘连中的作用[J];生命的化学(中国生物化学会通讯);1992年06期

10 韩嵘,苏平,尚克刚;对小鼠ES细胞进行特异性的标记[J];遗传学报;2001年09期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 江键;崔黎丽;宋诚荣;王小平;宋茂海;;负极性驻极体诱导3T3细胞表面电荷和游离钙浓度的变化[A];第四届中国功能材料及其应用学术会议论文集[C];2001年

2 汪洋;朱椰凡;余华军;符竣惠;徐启纲;曾其强;吴建波;张启瑜;;三种全肝脏去细胞化流程对细胞外基质的影响及细胞组分残留量的研究[A];2013年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2013年

3 刘文涛;田志刚;魏海明;;重组人IL-12在CHO-K1细胞中的表达[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

4 崔克明;;植物的细胞分化和龄[A];西部地区第二届植物科学与开发学术讨论会论文摘要集[C];2001年

5 范文红;吴燕;景孝堂;杨应忠;范明;;ASH2L对P19细胞的抑生长及促神经系统分化作用[A];中国生理学会第六届全国青年生理学工作者学术会议论文摘要[C];2003年

6 原野;吴志军;陆钢;牛红军;刘铁成;杨凤铎;杨栋;李会成;;利用宽体锥底细胞反应器对CHO细胞的悬浮培养研究[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年

7 曾志南;李复雪;;青蛤Cyclina sinensis精细胞分化的超微结构研究[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学分会第三次代表大会暨第四次学术讨论会论文集[C];1988年

8 熊世勤;赵秋辉;荣知立;黄冠榕;黄益玲;陈培拉;张淑萍;刘力;常智杰;;hSef通过干扰Ras-MAPK信号通路抑制PC12细胞分化[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年

9 潘晓艳;陈国强;傅国辉;;阴离子交换蛋白2介导As_2O_3的功能:As_2O_3诱导细胞分化和凋亡的pH值依赖性机制[A];第十次中国生物物理学术大会论文摘要集[C];2006年

10 朱安友;陈礼文;李柏青;;人外周血分枝结核杆菌抗原反应性γδT细胞难以分化为Th2型细胞[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 张佳星;干细胞分化路径存在差异性[N];中国矿业报;2008年

2 常丽君;美生物学家打造出“细胞黑客”[N];科技日报;2010年

3 张佳星;分化之路 殊途同归[N];科技日报;2008年

4 记者陈超;日开发细胞间隔离培养技术[N];科技日报;2003年

5 陈超;科学家发现引发细胞分化的分子通道[N];科技日报;2010年

6 钱铮;日本新发现,可能修改传统血细胞分化路径图[N];新华每日电讯;2008年

7 ;人体细胞按“程序”生死[N];大众科技报;2002年

8 陈超;细胞内单分子运动得以精密再现[N];科技日报;2010年

9 吴挺;这也是一个“诺贝尔伦理学奖”[N];东方早报;2012年

10 刘霞;悬浮技术可大规模制造老鼠干细胞[N];科技日报;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 彭勇;低强度瞬态电磁场导致细胞膜穿孔的研究[D];四川大学;2001年

2 李珍;胰岛素样生长因子-1联合外源性转录因子诱导小鼠iPS细胞的研究[D];华中科技大学;2012年

3 郑宇;支架蛋白palladin在细胞分化和侵袭中的作用[D];吉林大学;2013年

4 金海啸;小鼠Cajal-Retzius细胞发生及其细胞周期相关蛋白的表达[D];河南大学;2012年

5 贺晓日;HCMV感染对HEL细胞MCM装载因子Cdc6与Cdt1的影响[D];中南大学;2007年

6 张雯;NGF诱导PC12细胞分化的作用机制及NGF保护作用的研究[D];武汉大学;2004年

7 安治星;VEGF对微小凹结构中SH-SY5Y细胞VGCCs功能响应的影响[D];重庆大学;2012年

8 王媛;Jagged-1抑制Th17细胞分化的机制初探[D];暨南大学;2013年

9 金杰;脂肪来源具有干细胞潜能的细胞的体外生长特性[D];浙江大学;2006年

10 章淑芳;小鼠ES细胞的定向诱导分化与建系实验研究[D];浙江大学;2004年

，

本文编号：862910