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铜绿假单胞菌PAO1中4个具有GGDEF-EAL结构域基因的研究

发布时间:2017-09-17 02:32

  本文关键词:铜绿假单胞菌PAO1中4个具有GGDEF-EAL结构域基因的研究


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【摘要】:目的对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)野生型PAO1中与环鸟苷二磷酸(C-di-GMP)代谢相关的4个具有GGDEF-EAL结构域基因(PA0285、PA0575、PA5295、PA5442)进行初步研究。方法分析4个基因的转座子突变菌株进行生物膜(Biofilm)及泳动性(Motility);利用PCR对4个基因的催化结构域进行克隆并构建原核表达载体,经IPTG诱导后检测重组蛋白的表达情况。结果生物膜分析显示,PA0285、PA0575、PA5442的转座子突变体较野生型PAO1间生物膜合成发生变化,其A值差异有统计学意义(P=0.000,P0.05);PA5295转座子突变体与PAO1间生物膜合成差异无统计学意义(P=0.232,P0.05);泳动性分析显示,PA0285、PA0575、PA5442的转座子突变体菌落直径与PAO1比较差异有统计学意义(P=0.000,P0.05),PA5295的转座子突变体与PAO1间比较差异无统计学意义(P=0.083,P0.05)。4个基因的催化结构域原核表达载体构建成功,并在大肠埃希菌中表达目的蛋白。结论初步分析表明PA0285、PA0575、PA5442均影响细菌的生物膜合成及运动性,为4基因的功能研究奠定了基础。
【作者单位】: 宁夏医科大学基础学院;宁夏医科大学临床医学院;宁夏医科大学生物化学与分子生物学教研室;
【关键词】铜绿假单胞菌 C-di-GMP GGDEF-EAL 基因研究
【基金】:国家自然科学基金项目(No.81060126;81260243) 宁夏医科大学2014年"大学生创新创业训练计划"项目(No.S2014004)
【分类号】:R378.991
【正文快照】: ***铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种条件致病菌,在某些特定条件下,尤其是免疫力缺损及院内感染时,该菌会导致严重后果[1]。PA野生株PAO1同时又是一种模式生物,其基因组已经测序完成[2]。***环鸟苷二磷酸(cyclic di-guanylate mono-phos-phate,C-di-GMP)作为近

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