人白介素-38原核表达载体的构建及其蛋白表达、纯化

发布时间：2017-09-22 15:13

  本文关键词：人白介素-38原核表达载体的构建及其蛋白表达、纯化

  更多相关文章： IL- 原核表达载体 重组蛋白 纯化

【摘要】：$目的%构建人白介素(interleukin,IL)-38原核表达载体,原核表达IL-38重组蛋白、纯化及活性分析。[方法]PCR扩增IL-38成熟蛋白编码区,构建IL-38原核表达载体p ET-44-h IL-38,转化BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导,表达IL-38重组蛋白,并利用其C末端的组氨酸标签进行镍离子亲和层析纯化,将纯化的重组IL-38作用于脂多糖(LPS)诱导的THP-1细胞,研究纯化IL-38蛋白的生物学活性。[结果]构建的IL-38原核表达载体测序结果与Gen Bank中基因序列一致;IPTG诱导产生的IL-38蛋白主要以可溶性形式存在,纯化的目的蛋白经SDS-PAGE凝胶电泳分析和Western Blot鉴定发现,蛋白纯度可达98%,细胞实验证明纯化的目的蛋白具有较高的生物学活性。[结论]成功构建了IL-38的原核表达载体,制备了具有生物活性的IL-38重组蛋白。
【作者单位】： 宁波大学医学院免疫学研究室;
【关键词】： IL- 原核表达载体 重组蛋白 纯化
【基金】：浙江省教育厅科研项目(“重组IL-38对哮喘气道炎症的作用及应用研究”,No.Y201327689) 浙江省公益技术应用研究(实验动物)计划项目(“IL-38转基因小鼠的建立及在高脂饮食诱导肥胖小鼠模型中的作用”,No.2016C37139)
【分类号】：Q78;R392
【正文快照】： 白细胞介素(interleukin,IL)-38是新近发现的IL-1家族(IL-1F)细胞因子的第10个家族成员,是2001年首先用寡核苷酸探针杂交及生物信息学技术分析发现并鉴定的细胞因子[1-2],曾被称为IL-1HY2。IL-38基因横跨7.8 kb,其中包含5个外显子,编码一个由152个氨基酸残基组成的蛋白质,其分

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘硕;黄钟;罗新萍;刘志刚;陈思;;家蚕蚕蛹过敏原几丁质酶基因的克隆和原核表达载体的构建[J];热带医学杂志;2010年05期

2 杨树国;王雅静;朱晓燕;帖超男;廖琳;;阴道毛滴虫黏附蛋白33基因原核表达载体的构建及表达[J];四川动物;2008年06期

3 巴彩凤;聂茹;;pGEX-4T-1-cMC4R原核表达载体的构建与表达[J];安徽农业科学;2008年23期

4 耿梅;陈清;徐丽慧;张延亭;何贤辉;;人白细胞介素7重组蛋白原核表达载体在大肠杆菌中的表达和鉴定[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2010年04期

5 刘芳;党国全;;融合毒素TOP_3表达载体的构建[J];青海医学院学报;2010年03期

6 刘成倩;王静;李红;于宗幸;易建中;陈磊;;鸡干扰素-α基因原核表达载体的构建及高效表达[J];中国畜牧兽医;2014年04期

7 刘华伟;张宏;孙超;王庆贺;宋艳瑞;;增强型绿色荧光蛋白原核表达载体的构建及其表达[J];西北农业学报;2012年02期

8 任圣俊,蒋惠秋,顾健人;大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶基因克隆及其原核表达载体构建、表达[J];科学通报;1997年19期

9 李德玲;张前军;顾巍;;胰岛素前体基因克隆及其原核表达载体的构建[J];汕头大学医学院学报;2014年01期

10 刘占通;崔保安;舒畅;金喜新;陈红英;杨明凡;魏战勇;;猪α干扰素原核表达载体的构建及表达[J];河南农业大学学报;2006年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 邬玉兰;刘志刚;;牛奶主要过敏原β-乳球蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建[A];中华医学会2009年全国变态反应学术会议论文汇编[C];2009年

2 刘全华;华丽;霍婧;鲍一笑;;人白介素13原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年

3 刘林林;王铁君;杨艳明;苏清秀;殷胜松;张奇;龚守良;;小鼠分泌型内皮抑素原核表达载体pNZ44-ssEndostatin的构建及表达[A];中华医学会放射肿瘤治疗学分会六届二次暨中国抗癌协会肿瘤放疗专业委员会二届二次学术会议论文集[C];2009年

4 杨海杰;管宝全;罗文新;李少伟;鲜阳凌;张军;夏宁邵;;含分泌信号的原核表达载体的组建及应用[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年

5 彭旭;袁顺宗;王晓娟;甘成军;王庆红;陈烯伟;张小容;胡晓红;罗高兴;吴军;;人HT036蛋白的原核表达及鉴定[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年

6 李慎涛;欧阳红生;张玉静;张锐;廖晓萍;孙博兴;张永亮;;猪肌生成抑制素基因原核表达载体的构建及其表达[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C];2001年

7 李慎涛;欧阳红生;张玉静;张锐;廖晓萍;孙博兴;张永亮;;猪肌生成抑制素基因原核表达载体的构建及其表达[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年

8 徐海燕;徐志伟;;人胰岛素样生长因子-1的原核表达载体的构建[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年

9 李士泽;张艳宇;张玉静;;凋亡蛋白融合基因原核表达载体的构建及序列分析[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年

10 鲍德明;胡乃中;沈际佳;石海;许建明;;人巨噬细胞金属弹力酶催化域基因原核表达载体的构建与鉴定[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编（下册）[C];2007年

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 刘芳;1.Keap1和p65蛋白相互作用及其作用机制研究 2.Mayven不同截短体原核表达载体的构建、表达和纯化[D];重庆医科大学;2008年

2 王桂武;重组IGFBP-4蛋白的表达、纯化、晶体生长及其对鹿茸细胞增殖抑制的研究[D];中国农业科学院;2008年

，

本文编号：901527