HEK293T细胞表达的单核细胞趋化蛋白1促进巨噬细胞迁移

发布时间：2017-09-22 21:14

  本文关键词：HEK293T细胞表达的单核细胞趋化蛋白1促进巨噬细胞迁移

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【摘要】：目的构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)真核表达载体,转染人胚肾HEK293T细胞,验证其对巨噬细胞的趋化作用。方法小鼠基因组DNA作模板,用PCR法获得MCP-1启动子区基因片段,插入p FLAGCMV1载体。用双酶切法和测序鉴定正确后,将构建好的病毒载体转染HEK293T细胞,用Western blot法检测MCP-1的表达,用Transwell~(TM)实验检测转染后细胞分泌的MCP-1对巨噬细胞的趋化作用。结果重组载体酶切鉴定在相应位置有目的片段,转染单核细胞趋化因子重组载体后的HEK293T细胞有MCP-1表达,转染后HEK293T细胞分泌的MCP-1明显增加巨噬细胞的迁移。结论HEK293T细胞表达的MCP-1明显增强巨噬细胞的迁移。
【作者单位】： 第四军医大学附属西京医院肾脏内科;第四军医大学基础部医学遗传与发育生物学教研室;
【关键词】： 巨噬细胞 单核细胞趋化蛋白(MCP-) 真核表达载体 载体构建
【基金】：国家自然科学基金(81370811)
【分类号】：R363
【正文快照】： 巨噬细胞在机体的生理和病理过程中均发挥着重要作用。生理状态下,巨噬细胞主要维持组织稳态,在机体组织受损后,巨噬细胞会快速迁移到受损部位,发挥促炎、抗炎、抗感染等功能[1]。巨噬细胞参与多种疾病的发生发展,影响疾病的预后,如新月体型肾小球肾炎肺动脉高压、肺纤维化、

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本文编号：902897