结核分枝杆菌FtsZ的异源表达及酶学性质研究

发布时间：2017-09-24 12:05

  本文关键词：结核分枝杆菌FtsZ的异源表达及酶学性质研究

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【摘要】：作为细菌分裂所必需的微管蛋白类似物,丝状温度敏感蛋白Z(filamentous temperature-sensitive protein Z,FtsZ)被认为是一个具有潜力的药物作用新靶点。为了构建高纯度的FtsZ重组蛋白分离纯化体系,探讨其酶学性质,该研究利用大肠杆菌BL21异源表达结核分枝杆菌FtsZ重组蛋白,通过Ni亲和层析柱和G-50层析柱纯化目的蛋白,采用孔雀石绿法和90°光散射法测定FtsZ重组蛋白的GTP酶活和蛋白聚集。研究结果表明:成功获得具有生物学活性的结核分枝杆菌FtsZ重组蛋白,其相对分子质量约为49kD;该酶最适反应温度为37℃,最适pH为6.8,金属离子Mg~(2+)和K~+对FtsZ重组蛋白酶活具有促进作用,有机溶剂DMSO和TritonX-100的体积分数分别高于0.1%和0.005%时对酶活有显著抑制作用(P0.05)。此外,FtsZ重组蛋白在加入底物GTP诱导后,快速聚集。本实验利用基因工程技术成功获得具有生物活性的FtsZ重组蛋白,并明确了该蛋白质的酶学性质,为其进一步的研究和应用奠定了基础。
【作者单位】： 浙江中医药大学药学院;
【关键词】： 结核分枝杆菌 丝状温度敏感蛋白Z(FtsZ) 异源表达 分离纯化 酶活 蛋白聚集
【基金】：浙江省新苗人才计划(2015R410029)
【分类号】：R378.911
【正文快照】： (Life Science Research,2016,20(6):486~491)肺结核是一种由结核分枝杆菌引起的肺部慢性感染性疾病[1],是目前导致人类死亡的前三大传染性疾病之一。在导致结核病流行的众多因素中,结核病的耐药性已经成为最重要的因素之一[2],人类病原微生物耐药性的提高,严重影响传染性疾病

【相似文献】

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1 程婕;龚毅;杨凌;;细胞色素P450酶系的异源表达研究[J];河北大学学报(自然科学版);2006年03期

2 ;[J];;年期

，

本文编号：911289