小鼠原始生殖细胞分离培养方式和生物特性研究

发布时间：2017-09-25 02:08

  本文关键词：小鼠原始生殖细胞分离培养方式和生物特性研究

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【摘要】：目的探索一种简单高效的分离、培养小鼠原始生殖细胞(PGCs)的方法,为小鼠模型提供充足的PGCs来源。方法体外分离小鼠12.5dpc胚胎生殖嵴,剪碎后用含血清、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂、卵泡刺激素、重组表皮生长因子的α-MEM培养基进行组织块贴壁培养;于倒置显微镜下观察细胞形态,采用流式细胞术检测阶段性特异性胚胎抗原,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、细胞免疫荧光等方法检测干细胞的多能性基因Oct4及减数分裂Ⅰ期的几个特异性基因的表达。结果体外分离培养的小鼠PGCs具有良好的细胞形态、极强的增殖能力,SSEA-1表达阳性,SSEA-4表达阴性,同时检测到Oct4、Stra8、Vasa、SCP3、ZP3表达均为阳性。结论利用该实验方法能培养出高纯度、具有良好干性及极强增殖能力的小鼠PGCs,并使该细胞进入减数分裂。
【作者单位】： 第三军医大学西南医院妇产科;
【关键词】： 小鼠原始生殖细胞 细胞培养 减数分裂
【基金】：国家自然科学基金项目资助(31101058) 重庆市自然科学基金资助项目(CSTC2011jjA10075)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 目前,已有3种生殖细胞可以演化出多能干细胞,它们分别为:胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EGCs)、胚胎癌细胞(embryonic carcinoma cells,ECCs)及多潜能种系干细胞(multipotentgermline stem cells,MGSC-s)[1-3]。其中,来源于原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)的EG

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本文编号：914749