7型庚型肝炎病毒包膜糖蛋白E2基因的克隆及原核表达分析

发布时间：2017-09-25 20:27

  本文关键词：7型庚型肝炎病毒包膜糖蛋白E2基因的克隆及原核表达分析

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【摘要】：为了探究7型庚型肝炎病毒E2基因编码蛋白作为ELISA试剂盒研发所需检测抗原的可能性,建立更为可靠的GBV-C检测方法,本研究应用在线软件对GBV-C E2基因序列的编码区进行生物信息学分析,预测了E2基因编码蛋白的抗原表位、空间结构及线性B细胞表位等;通过逆转录PCR从7型GBV-C病毒中克隆出E2基因片段,将其克隆到pET-32a载体上,重组载体pET-32a-E2转化大肠杆菌BL21后诱导表达,用12%SDS-PAGE检测,结果重组蛋白主要以包涵体形式存在,其分子量大小约为55kD,利用His标签抗体对重组蛋白进行Western-blotting验证。结果表明GBV-C E2蛋白有多个抗原表位点,克隆的E2基因序列长度为945bp,重组蛋白以包涵体形式表达,其分子量大小与预期一致,此研究为GBV-C检测试剂盒的研制工作奠定了基础。
【作者单位】： 昆明理工大学生命科学与技术学院;
【关键词】： 庚型肝炎病毒 包膜糖蛋白 克隆 表达分析
【基金】：国家自然科学基金(项目号:81360247)
【分类号】：R373.21
【正文快照】： 庚型肝炎病毒(GBV-C)属黄病毒科、Pegivirus病毒属、单链RNA病毒。GBV-C基因组全长约9.4kp,包含一个可以编码6个(E1、E2、NS2、NS3、NS4及NS5)多聚蛋白前体的开放阅读框[1]。GBV-C的传播途径与HIV病毒相似,主要通过母婴、性以及血液传播[2]。在发达国家,GBV-C在普通人群中的感

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本文编号：919443