不同接种密度对Caco-2细胞吸收模型分化及去极化评价指标的影响

发布时间：2017-09-26 01:07

  本文关键词：不同接种密度对Caco-2细胞吸收模型分化及去极化评价指标的影响

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【摘要】：为确定不同接种密度对Caco-2细胞吸收模型分化及去极化评价指标的影响,以及细胞模型适用于吸收和转运试验的时间,采用Caco-2细胞高密度(1×105cells·cm-2)、中密度(5×104cells·cm-2)和低密度(3×104cells·cm-2)等3个接种密度,分别接种于带聚碳酸酯微孔滤膜插槽的Transwell 6孔板上,培养29 d,通过测定跨膜电阻值(TEER)、碱性磷酸酶活性(ALP)和酚红透过率,评价细胞单层的完整性、极化和透过性。结果表明,高、中、低密度接种分别于第12天、第15天和第18天TEER值超过600Ω·cm2,第27天、第29天和第29天TEER值开始下降。高、中、低密度接种分别于第15天、第18天和第21天上下侧碱性磷酸酶活性的比值都能达到10倍以上,第29天开始降低。高、中、低密度接种分别于第9天、第12天和第15天酚红透过率小于0.5%。综合以上3项指标,高密度接种细胞在第15天、中密度接种细胞在第18天、低密度接种细胞在第21天开始,可以用于吸收和转运试验,27 d以后细胞活力就开始下降,不适合做细胞模型。
【作者单位】： 河北科技师范学院;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;
【关键词】： Caco-细胞 跨膜电阻(TEER) 碱性磷酸酶(ALP) 酚红
【基金】：国家自然科学基金项目(项目编号:31272465)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： Caco-2细胞在体外聚碳酸酯微孔滤膜上培养时,能自发分化并形成类似肠道上皮细胞的结构特征和生化特性,如在细胞间形成紧密连接,在细胞表面形成良好的刷状缘和微绒毛结构,并可分泌水解酶以及合成转运糖、氨基酸和药物等的载体转运系统等[1]。因此,该模型在药理[2]、毒理[3]、生，

本文编号：920591