卷曲螺旋结构域蛋白74B对纤毛生成和细胞周期调控作用研究

发布时间：2017-09-26 08:28

  本文关键词：卷曲螺旋结构域蛋白74B对纤毛生成和细胞周期调控作用研究

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【摘要】：背景卷曲螺旋结构域蛋白(CCDC)参与基因转录、细胞凋亡及细胞周期过程,并调控恶性肿瘤细胞的侵袭和转移等多种生物学行为,然而多数CCDC的生物学功能目前尚未明确。目的探讨CCDC74B的细胞定位及对纤毛生成和细胞周期的影响。方法 2013年3—9月通过构建在人视网膜色素上皮(RPE1)中的Tet-On表达系统,实现CCDC74B在细胞内的蛋白表达,然后通过细胞免疫荧光染色观察CCDC74B的细胞定位,通过小干扰RNA(siRNA)转染敲除CCDC74B在RPE1细胞中的表达,分为对照组、siRNA#1组、siRNA#2组,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测CCDC74B mRNA表达水平;采用细胞免疫荧光染色及流式细胞术观察下调CCDC74B表达后纤毛生成情况和对细胞周期分布的影响。结果在正常上皮细胞中,CCDC74B位于中心体,细胞免疫荧光染色示,下调CCDC74B表达后细胞初级纤毛生成。siRNA#1组及siRNA#2组转染后36 h及48 h纤毛生成率分别高于对照组(P0.05)。RT-PCR法结果显示,siRNA#1组及siRNA#2组均有效抑制了CCDC74B mRNA表达。细胞免疫荧光染色示,下调CCDC74B表达后cyclin A表达减少,提示存在细胞周期停滞;流式细胞术检测示,下调CCDC74B表达后G_1期细胞比例增高,S期及G_2/M期细胞比例减少。结论中心体蛋白CCDC74B在细胞增殖过程中参与对纤毛生成和细胞周期的调控。
【作者单位】： 同济大学附属同济医院血液科;
【关键词】： 卷曲螺旋结构域蛋白 纤毛 细胞周期 细胞增殖
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31301118)
【分类号】：R363
【正文快照】： Regulatory Effect of CCDC74B on Cilia Formation and Cell Cycle LI Ping,FANG Xia,CAO Yu-na,et al.Departmentof Hematology,Tongji Hospital of Tongji University,Shanghai 200065,China卷曲螺旋结构域蛋白(CCDC)是其序列中存在一个或数个卷曲螺旋结构域而被命名的一类

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本文编号：922511