Compound C抑制腺苷酸活化蛋白激酶的磷酸化后对缺氧预处理的影响及其机制

发布时间：2017-09-26 21:04

  本文关键词：Compound C抑制腺苷酸活化蛋白激酶的磷酸化后对缺氧预处理的影响及其机制

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【摘要】：【目的】探讨Compound C抑制腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的磷酸化后对缺氧预处理的影响。【方法】筛选合适的Compound C浓度。将细胞分为Compound C组和non-Compound C组,以上两组再各自分为3个亚组:对照组(control);缺氧预处理+缺氧组(Hyp+OGD);单纯缺氧组(OGD);噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞活性。ATP荧光检测试剂盒测定胞内的ATP水平。Western Blot法测定各组细胞内AMPKα,磷酸化的AMPKα(P-AMPKα),过氧化物酶体增生激活受体-γ共刺激因子-1α(PGC-1α)的蛋白表达水平。【结果】OGD后Compound C组(0.418±0.021)和non-Compound C组(0.640±0.028)相比,细胞活性下降更明显(P0.01),经预处理后细胞活性均增加(P均0.05),加入Compound C后,control组细胞活性下降3.5%(P=0.473),OGD组细胞活性下降34.6%(P0.01),而缺氧预处理后细胞活性下降21.1%(P0.05)。OGD后Compound C组(0.042±0.001)和non-Compound C组(0.051±0.001)相比,ATP下降更明显(P0.05),经预处理后ATP水平分别增加了21.5%及28.0%(P均0.05)。Compound C 3组AMPKα蛋白的表达与non-Compound C对应的3组相比差异无统计学意义(P均0.05)。OGD后,Compound C组与non-Compound C组细胞P-AMPKα蛋白的表达均明显增加(与各自的对照组比较,P均0.05)。经预处理后,non-Compound C组P-AMPKα蛋白的表达较单纯OGD组增加(P0.05),但Compound C组P-AMPKα蛋白的表达与单纯OGD组间的差异无统计学意义(P=0.935)。Compound C组细胞PGC-1α蛋白的表达与non-Compound C组对应的3组比较明显下降(P均0.05),其中control组下降了68.1%,Hyp+OGD组下降了24.7%,OGD组下降了39.6%,Hyp+OGD及OGD相对于各自control组均上调其表达(P均0.05),且预处理组的上调更明显(与OGD组比较,P均0.05)。【结论】Compound C抑制AMPK的激活后,PGC-1α的表达下调,AMPK为缺氧预处理或缺氧处理上调PGC-1α的其中一条途径,抑制其活体P-AMPKα后其他的途径仍然在缺氧预处理中发挥重要的细胞保护作用。
【作者单位】： 中山大学附属第三医院康复医学科;中山大学附属第一医院特诊内科;中山大学附属第一医院神经内科;江门市中心医院;
【关键词】： 腺苷酸活化蛋白激酶 过氧化物酶体增生激活受体-γ共刺激因子-α 缺氧预处理 Compound C
【基金】：国家自然科学基金(81071069) 广东省科技计划项目(201013080701008)
【分类号】：R364.4
【正文快照】： 缺氧预处理(hypoxic preconditioning,Hyp)是指预先反复短暂缺氧,可使组织或细胞对后续严重的缺氧打击产生抵抗或耐受的一种生物学效应[1]。但其保护具体机制尚不明确。腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)作为代谢燃油表,在维持细胞内的能量平衡方面具有

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3 李娜;李玲;李超英;赵嘉;汪倩;王莹;陶玉倩;;腺苷酸活化蛋白激酶在缺氧预处理中的保护作用及机制[J];中风与神经疾病杂志;2012年01期

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本文编号：925700