酶解法分离与同源血清培养SD大鼠胃Cajal间质细胞的实验研究

发布时间：2017-09-28 01:16

  本文关键词：酶解法分离与同源血清培养SD大鼠胃Cajal间质细胞的实验研究

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【摘要】：[目的]探讨体外酶解法分离、同源血清培养SD大鼠胃Cajal间质细胞(ICC)的实验方法。[方法]无菌条件下分离大鼠胃窦组织,酶解法分离制备ICC细胞悬液,接种于M199完全培养基(含10%大鼠同源血清,不含胎牛血清及重组鼠类干细胞因子)进行培养,倒置显微镜下观察细胞形态变化,适时换液,MTT法测定ICC对数生长曲线,C-kit特异性抗体免疫荧光染色法鉴定ICC,并取对数生长期细胞进行传代培养。[结果]同源血清培养ICC成活并体现其特有的生长曲线及形态学特征,C-kit特异性抗体免疫荧光染色证实细胞为ICC,且细胞传代培养成功。[结论]酶解法可以对SD大鼠胃窦ICC进行分离,在不使用胎牛血清(FBS)及重组鼠类干细胞因子(SCF)培养的条件下,含大鼠同源血清的M199完全培养基可以完成ICC原代培养及传代培养。该项培养方法可行,为研究ICC生物学特性及其与胃肠病学的临床和基础关系奠定基础。
【作者单位】： 广西医科大学第一附属医院;
【关键词】： Cajal间质细胞 胃窦 SD大鼠 同源血清 细胞培养技术
【基金】：国家自然科学基金项目(编号:81360544)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 胃肠道Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)作为胃肠运动的起搏细胞,可以产生自主节律性慢波电位,通过突起和缝隙连接作用于胃肠平滑肌细胞,促进平滑肌的节律性舒缩;胃肠神经递质通过ICC介导影响平滑肌,形成“肠神经 ICC-平滑肌细胞”功能结合体进行调控胃肠道的

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