脂多糖联合三磷酸腺苷对肺上皮细胞来源A549细胞IL-1β分泌的影响及其机制研究

发布时间：2017-09-28 07:33

  本文关键词：脂多糖联合三磷酸腺苷对肺上皮细胞来源A549细胞IL-1β分泌的影响及其机制研究

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【摘要】：目的探讨白细胞介素1β(IL-1β)在脂多糖(LPS)联合三磷酸腺苷(ATP)诱导的人肺上皮细胞来源A549细胞中的表达变化及其机制。方法以肺上皮细胞来源的A549细胞作为研究对象,采用Western blotting法确认A549细胞中是否存在NLRP3炎症体各组件蛋白(NLRP3、ASC、caspase-1)的表达。检测不同浓度LPS(0、1、5、10、50、100μg/ml)对A549细胞NLRP3炎症体通路蛋白表达(Western blotting检测)及IL-1β分泌(ELISA法)的影响,选择最佳LPS浓度。采用LPS联合ATP(LPS+ATP)刺激A549细胞,并检测其对NLRP3炎症体通路蛋白表达和IL-1β分泌的影响。采用siRNA干扰A549细胞NLRP3基因,观察LPS+ATP诱导的A549细胞中IL-1β的分泌情况。结果 Western blotting检测结果显示,A549细胞中存在NLRP3炎症体组件蛋白NLRP3、ASC、caspase-1的表达。与对照组比较,LPS单独处理细胞后,NLRP3、pro-IL-1β、caspase-1p45蛋白表达增加(P0.05),且呈剂量依赖关系,但未检测到活化形式caspase-1p20蛋白的表达及细胞因子IL-1β的分泌。与LPS单独刺激组相比,LPS+ATP刺激组可检测到活化形式的caspase-1p20蛋白表达及细胞因子IL-1β分泌(P0.05)。采用siRNA干扰NLRP3基因表达可显著抑制LPS+ATP诱导的IL-1β表达(P0.05)。结论 A549细胞中存在NLRP3炎症体通路,LPS+ATP诱导A549细胞分泌的细胞因子IL-1β在下调NLRP3基因后显著减少,初步提示IL-1β的释放受NLRP3炎症体途径调控。
【作者单位】： 第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所;
【关键词】： 白细胞介素β ATP酶 脂多糖类
【分类号】：R363
【正文快照】： 白细胞介素1β(IL-1β)主要由激活的巨噬细胞等免疫细胞合成和释放,在局部低浓度时主要发挥免疫调节作用[1],而大量释放可引起连锁和放大效应,募集更多的炎性细胞到病变部位释放大量促炎性介质,引起炎症级联反应[2-3]。IL-1β广泛参与了包括急性呼吸窘迫综合征(acute respirat

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本文编号：934634