SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM和Rab7的相互作用

发布时间：2017-09-30 11:35

  本文关键词：SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM和Rab7的相互作用

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【摘要】：目的研究Rab7在结核分枝杆菌毒力因子分泌性酸性磷酸酶(SapM)诱导的自噬体-溶酶体融合阻断中的作用。方法采用Rab7小干扰RNA(si Rab7)转染Raw264.7细胞,Western blot法检测P62蛋白水平。m Cherry-SapM转染Raw264.7细胞后免疫荧光检测SapM与Rab7共定位情况,免疫共沉淀分析SapM与Rab7的关系。用3种SapM的突变体SapM△ARCA,SapM△FRED和SapM△CT转染Raw264.7细胞,分析SapM的不同突变体与Rab7的关系。结果 si Rab7处理后,细胞P62水平显著增高;免疫组织化学染色结果显示SapM与Rab7在胞内共定位;免疫共沉淀分析显示SapM与Rab7可相互沉淀;3种不同突变形式的SapM中,只有SapM△CT不能与Rab7相互作用。结论 SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM与Rab7的相互作用。
【作者单位】： 安徽理工大学医学检验中心;安徽理工大学医学院医学免疫学与检验教研室;安徽理工大学附属肿瘤医院;
【关键词】： 分泌性酸性磷酸酶(SapM) 自噬 Rab 融合
【基金】：国家自然科学基金(81302524,81202294,81571528) 安徽省科技攻关项目(1604a0802091)
【分类号】：R378.911
【正文快照】： 自噬是真核细胞的一种保护机制,具有处理细胞内难以降解的细胞器、蛋白质聚集物和微生物的功能[1]。自噬过程大致分为两个阶段[1-2]:第一阶段的主要事件是自噬体形成,其调控分子和信号通路已较为明确;第二阶段自噬体需要与溶酶体融合以降解其内容物。自噬体与溶酶体的融合在消

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本文编号：948012