琼脂糖明胶皮下埋植法富集、分离具有自发NETs倾向的小鼠中性粒细胞
本文关键词:琼脂糖明胶皮下埋植法富集、分离具有自发NETs倾向的小鼠中性粒细胞
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【摘要】:目的建立小鼠中性粒细胞富集、分离的方法,为进一步探讨中性粒细胞及中性粒细胞胞外捕网(NETs)的免疫损伤效应奠定基础。方法制备2%琼脂糖0.2%明胶块,埋植于健康6~8周龄C57雌性小鼠皮下富集中性粒细胞,96 h后取出明胶块置于PBS中进行游离释放,收集细胞。荧光染色进行细胞形态学观察,采用Gr-1及CD11b进行流式细胞分析鉴定。结果不同表面积的明胶能够分离出106~107数量级细胞,具有中性粒细胞典型的分叶核形态学特征,流式细胞分析鉴定为Gr-1+CD11b+的中性粒细胞,纯度可达95.7%,并观察到典型NETs形成,其数量随分离时间的延长而增加。结论通过皮下埋植琼脂糖明胶成功富集、分离大量高纯度且具有自发NETs倾向小鼠中性粒细胞。
【作者单位】: 第三军医大学新桥医院肾内科;第三军医大学新桥医院基础部免疫学教研室;
【关键词】: 中性粒细胞 中性粒细胞胞外捕网 细胞分离 天然免疫 琼脂糖明胶
【基金】:国家自然科学基金青年基金(81400736)
【分类号】:R392.12
【正文快照】: 王卫黎,蔡娟,谢丽娇,王渊,黄鑫,高雪静,唐莎,张莹,王莉,邹丽云,张静波*中性粒细胞也称多形核白细胞(polymorphonuclearneutrophils,PMNs),作为天然免疫的第1道防线,通过吞噬或释放蛋白水解酶及细胞毒素等杀灭病原体,在宿主抵抗外界病原体侵袭中起关键的作用。中性粒细胞胞外捕
【参考文献】
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【共引文献】
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【二级参考文献】
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,本文编号:956215
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