一种骨髓单个核细胞新型示踪方法——细胞膜染料DiD标记法

发布时间：2017-10-03 03:10

  本文关键词：一种骨髓单个核细胞新型示踪方法——细胞膜染料DiD标记法

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【摘要】：目的检测细胞膜染料DiD对骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells,BM-MNC)的染色效率和造血功能的影响,并用DiD示踪BM-MNC活体直观观察DiD标记的BM-MNC在小鼠颅骨骨髓内的顺利归巢。方法体外流式细胞术分析方法和激光共聚焦扫描显微镜成像方法检测BM-MNC的DiD染色效率;CCK-8细胞活性-增殖实验和造血集落形成实验,检测DiD染料对BM-MNC的造血功能的影响;单/双光子共聚焦显微镜下活体直观观察DiD标记的BM-MNC在小鼠颅骨骨髓内的归巢。结果 BM-MNC的DiD染色效率高达90%以上,且DiD对BM-MNC的细胞活性-增殖和造血能力均无明显的毒性影响(P0.05);单/双光子共聚焦显微镜下,在活体小鼠颅骨骨髓内可直观观察到DiD标记的BM-MNC的顺利归巢。结论细胞膜染料DiD对BM-MNC的染色效率高、均一,无明显细胞毒性,荧光不易被淬灭,且受机体自身组织的背景干扰少,用于活体示踪时DiD标记的BM-MNC可顺利归巢到骨髓。
【作者单位】： 复旦大学附属华山医院血液科;上海交通大学生物医学工程学院Med-X研究院;
【关键词】： 细胞膜染料 骨髓单个核细胞 造血干细胞移植
【基金】：国家自然科学基金(81561138002,91542109) 上海市基础研究重点项目(13JC1406404) 上海市优秀学术带头人计划(16XD1400600)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclearcell,BM-MNC)作为造血干细胞(hematopoieticstem cell,HSC)的主要来源之一,具有多种临床治疗潜能,且短时间易获取、不需要体外培养,目前已成功应用于临床上的造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)[1-4]。BM-M

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本文编号：962810