A型流感病毒血凝素蛋白S-棕榈酰化修饰的质谱分析
发布时间:2017-10-05 12:07
本文关键词:A型流感病毒血凝素蛋白S-棕榈酰化修饰的质谱分析
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【摘要】:蛋白质S-棕榈酰化修饰是指棕榈酸分子通过硫酯键共价结合在蛋白质分子的半胱氨酸(S)的巯基侧链上,是蛋白质脂类修饰的重要形式之一,在细胞信号转导、代谢等过程中起着重要作用。本实验首先利用酰基-生物素置换反应,将A型流感病毒血凝素蛋白上的S-棕榈酸分子转换为含有生物素(Biotin)分子的标签。生物素标记蛋白经特异性富集、电泳分离纯化后,进行胶内水解。再利用质谱技术对水解混合物进行分析。结果表明,经酰基-生物素置换方法处理A型流感病毒裂解产物后,蛋白质耦联生物素的浓度(羟胺处理,+Hydroxylamine)与空白对照组(未加羟胺处理,-Hydroxylamine)的比值大于3;对经富集后的流感病毒血凝素蛋白进行了质谱分析,鉴定了A型的两个S-棕榈酰化修饰位点,分别位于蛋白羧基末端的Cys_(562)和Cys_(565)。本研究为大规模研究S-棕榈酰化修饰蛋白提供了一种特异、有效的分析方法。
【作者单位】: 吉林大学第二医院;吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室;吉林省疾病预防与控制中心;
【关键词】: 流感病毒 血凝素蛋白 酰基-生物素置换 S-棕榈酰化
【基金】:国家自然科学基金(Nos.21175055,81673168,31372409) 吉林省科技厅项目(Nos.20110739,20150204001YY) 吉林大学白求恩计划B(No.2012210) 吉林省卫生计生委(No.2015Z041)资助项目~~
【分类号】:R373;O657.63
【正文快照】: 2(吉林大学人兽共患病研究所,人兽共患病研究教育部重点实验室,长春130062)3(吉林省疾病预防与控制中心,长春130041)本文系国家自然科学基金(Nos.21175055,81673168,31372409)、吉林省科技厅项目(Nos.20110739,20150204001YY)、吉林大学白求恩计划B(No.2012210)、吉林省卫生计
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,本文编号:976694
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