过表达IGF-1对脐带间充质干细胞氧化损伤的抑制作用
本文关键词:过表达IGF-1对脐带间充质干细胞氧化损伤的抑制作用
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【摘要】:目的:分析过表达胰岛素样生长因子1(IGF-1)对脐带间充质干细胞(UC-MSCs)氧化损伤的抑制作用,开发UC-MSCs新的应用模式。方法:通过酶消化法,从脐带组织中分离UC-MSCs,并采用流式细胞术对细胞的表面特异标志物进行鉴定,通过逆转录病毒感染体系,构建过表达IGF-1的UC-MSCs(UC-MSCs-IGF-1),并进一步通过实时荧光定量PCR和流式细胞术对UC-MSCs-IGF-1的IGF-1表达水平进行评价,同时分析UC-MSCs-IGF-1的表面标志物及成骨成脂分化能力;用不同浓度的H_2O_2(0μmol/L、10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L)处理细胞,分析UC-MSCs-IGF-1在增殖活力维持、抗氧化损伤和抗凋亡方面的优势。结果:UC-MSCs表面标志物CD29、CD90和CD105的表达均呈阳性,而CD34的表达为阴性,符合正常间充质干细胞的表型特征;实时荧光定量PCR和流式细胞术结果表明,应用逆转录病毒感染体系构建的UC-MSCs-IGF-1在IGF-1表达方面远高于正常UC-MSCs,同时干细胞表型与UC-MSCs一致,且具备正常的成脂成骨分化能力;在H_2O_2的氧化损伤作用下,与UC-MSCs相比,UC-MSCs-IGF-1具有较强的增殖活力和抗氧化、抗凋亡功能,同时细胞中的SOD活性略高于UC-MSCs。结论:过表达IGF-1对UC-MSCs的氧化损伤及氧化引起的凋亡均具有一定的防护作用,与正常UC-MSCs相比,UC-MSCsIGF-1可能在临床应用方面具有一定的优势。
【作者单位】: 暨南大学第二临床医学院 深圳市人民医院麻醉科;暨南大学第二临床医学院 深圳市人民医院检验科;中山大学人类病毒学研究所;吉林大学药学院再生医学系;
【关键词】: 脐带间充质干细胞 胰岛素样生长因子 氧化损伤 细胞凋亡
【基金】:深圳市知识创新计划(No.JCYJ20140416122812052) 吉林大学研究生创新基金资助项目(No.2015009) 深圳市卫生计生系统科研项目(No.201401010)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 近年来,以干细胞特别是成体干细胞为基础的新型治疗模式,已在多种疾病的治疗上进行了深入研究[1-4]。脐带间充质干细胞(umbilical cord mesen-chymal stem cells,UC-MSCs)具有多向分化潜能,还能够迁移至受损组织处,通过分泌营养因子促进损伤组织修复,在体内发挥功能的过程中未
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