不同营养干预对宫内发育迟缓大鼠肝脏HNF-4α及PEPCK表达的影响

发布时间：2017-03-31 06:51

  本文关键词：不同营养干预对宫内发育迟缓大鼠肝脏HNF-4α及PEPCK表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：通过孕鼠全程低蛋白饮食法建立宫内发育迟缓(Intrauterine growth retardation, IUGR)仔鼠模型,比较IUGR仔鼠生后3周在不同蛋白饮食喂养下对体重变化的影响,并同时测定血清空腹血糖、空腹胰岛素生化指标及IUGR仔鼠肝细胞核因子-4α (HNF-4a)、磷酸烯醇式苯酮酸激酶(PEPCK)表达的变化。探讨IUGR仔鼠在追赶性生长的同时可能发生远期代谢综合征的机制,为临床上IUGR/SGA患儿的早期营养支持提供一定的理论依据。方法：选用性成熟(体重200-250g,日龄70-80天)的SD雌鼠,采用孕期全程低蛋白饮食法建立IUGR动物实验模型。将SD孕鼠分为IUGR组和正常饮食对照组,分别给予低蛋白饲料和标准饲料喂养。孕鼠分娩后符合宫内发育迟缓标准的IUGR组新生仔鼠随机分为三组：IUGR标准蛋白组、IUGR低蛋白组、IUGR高蛋白组,母鼠分别予以标准饲料、低蛋白饲料、高蛋白饲料喂养3周,断乳后仔鼠予以标准饲料喂养至实验结束。正常饮食对照组中仔鼠随机设为对照组,母鼠予以标准饲料喂养3周,断乳后仔鼠继续标准饲料喂养至实验结束。用高精度电子秤称量0周(生后12小时内)、4周龄、12周龄三个时间点的体重,并用大鼠ELISA试剂盒分别测出各组三个时间点的血清空腹血糖、空腹胰岛素值及通过RT-PCR技术及Western blotting蛋白印记技术检测肝脏HNF-4a及PEPCK的表达量,结果使用SPSS19.0统计软件进行分析,P0.05表示差异有统计学意义。结果：1.死胎率：IUGR组仔鼠死胎率为16.4%(33/201),正常饮食对照组仔鼠死胎率为4.5%(4/88),差异有统计学意义(P0.05)。2.IUGR组与正常饮食组仔鼠出生体质量(g)分别为5.011+0.436,6.090±0.553,差异有统计学意义(P0.05)3. IUGR发生率：IUGR组仔鼠IUGR发生率为51.2%(86/168),正常饮食组仔鼠IUGR发生率为8.3%(7/84),差异有统计学意义(P0.05)。4.体质量(g)：出生时IUGR标准蛋白组仔鼠与正常饮食对照组的体质量分别为4.6854-0.191,6.331±0.382,两组比较差异有显著统(计学意义(P0.05)。4周时正常饮食对照组、IUGR标准蛋白组、IUGR氐蛋白组、IUGR高蛋白组体质量分别为：49.6244±7.594、45.387±4.921、27.213±±2.556、60.323±3.098；正常饮食对照组与IUGR标准蛋白组体质量没有差异,IUGR氏蛋白组体质量均低于正常饮食对照组、IUGR标准蛋白组及IUGR高蛋白组,并且正常饮食对照组、IUGR标准蛋白组体质量低于IUGR高蛋白组。12周时正常饮食对照组、IUGR标准蛋白组、IUGR低蛋白组、IUGR高蛋组体质量分别为：236.588±23.876、262.125±18.555、181.538±12.897、247.625±1 5.954,IUGR标准蛋白组体质量高于正常饮食对照组及IUGR低蛋白组,并且正常饮食对照组高于IUGR低蛋白组,正常饮食对照组与IUGR高蛋白饮食组没有差异。5.空腹血糖(mmol/L):出生时正常饮食对照组、IUGR标准蛋白组空腹血糖没有差异;4周时4组空腹血糖没有差异；12周时IUGR标准蛋白组、IUGR低蛋白组空腹血糖均高于正常饮食对照组,并且IUGR低蛋白组空腹血糖高于IUGR标准蛋白组,正常饮食对照组与IUGR高蛋白组空腹血糖没有差异。6.空腹胰岛素(mU/L)：出生时正常饮食对照组、IUGR标准蛋白组空腹胰岛素没有差异；4周时IUGR低蛋白组空腹胰岛素高于其他3组,其他3组空腹胰岛素没有差异；12周时IUGR标准蛋白组、IUGR氐蛋白组空腹胰岛素均高于正常饮食对照组、IUGR高蛋白组,并且IUGR低蛋白组空腹胰岛素高于IUGR标准蛋白组,正常饮食对照组与IUGR高蛋白组空腹胰岛素没有差异。7. HNF-4amRNA相对含量及蛋白表达相对量：出生时IUGR标准蛋白组低于正常饮食对照组；4周时IUGR标准蛋白组、IUGR氏蛋白组、IUGR高蛋白组均低于正常饮食对照组,并且IUGR氐蛋白组低于IUGR标准蛋白组、IUGR高蛋白组；12周时IUGR标准蛋白组、IUGR低蛋白组均低于正常饮食对照组、IUGR高蛋白组,并且IUGR低蛋白组低于IUGR标准蛋白组,正常饮食对照组与IUGR高蛋白组没有差异。8PEPCK mRNA相对含量及蛋白表达相对量：出生时IUGR标准蛋白组高于正常饮食对照组；4周时IUGR标准蛋白组、IUGR低蛋白组、IUGR高蛋白组均高于正常饮食对照组,并且IUGR低蛋白组高于IUGR标准蛋白组,IUGR标准蛋白组高于IUGR高蛋白组；12周时IUGR标准蛋白组、IUGR低蛋白组均高于正常饮食对照组、IUGR高蛋白组,并且IUGR氐蛋白组高于IUGR标准蛋白组,正常饮食对照组与IUGR高蛋白组没有差异。结论：1.生后早期高蛋白饮食可使IUGR仔鼠完成体重的追赶生长,并不出现糖代谢紊乱。2.宫内营养不良可造成IUGR仔鼠出生时HNF-4α基因表达下降及PEPCK基因表达上升,而这种改变可持续到成年时期,可能是IUGR仔鼠成年期发生代谢综合征的基础。
【关键词】：宫内发育迟缓 营养物质 肝细胞核因子-4α 磷酸烯醇式丙酮酸激酶 代谢综合征
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R722.1
【目录】：

• 中英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-9
• Abstract9-12
• 前言12-16
• 材料和方法16-26
• 结果26-35
• 讨论35-40
• 结论40-41
• 参考文献41-44
• 综述44-51
• 参考文献49-51
• 攻读学位期间发表文章情况51-52
• 致谢52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 周根来,陈才勇,王恬;胎儿宫内发育迟缓的实验动物模型[J];中国比较医学杂志;2003年02期

2 赵文惠;萧建中;杨文英;王娜;王昕;陈晓平;卜石;;肝脏胰岛素抵抗与肝糖输出调控基因表达的关系[J];中华肝脏病杂志;2006年01期

3 丘小汕,沈振宇,黄婷婷,杜敏联,柯志勇,赖峰;早期营养干预改善IUGR大鼠胰岛素抵抗及其与血清瘦素的关系[J];中山大学学报(医学科学版);2003年06期

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本文编号：279056