肾小管上皮细胞内质网应激时NGAL表达改变及调控机制

发布时间：2022-10-15 12:57

　　目的:探讨人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）发生内质网应激时,NGAL表达情况及相关调控机制。方法:将HK-2细胞随机分为6组,即对照组（正常生长的HK-2细胞）,TG（毒胡萝卜素,thapsigargin）组（5umol/L TG处理8 h）,单纯转染组（si RNA-ATF4试剂转染24h）,转染+TG组（siRNA-ATF4试剂转染24h后,5umol/L TG处理8 h）,阴性对照组（siRNA-阴性对照物转染24h）,DMSO组（5umol/L DMSO处理8h）。采用Western blot技术检测各6组细胞中CHOP、GRP78、NGAL、ATF4的表达情况,采用Real-time PCR方法测得ATF4mRNA、NGALm RNA表达量。结果:1.TG组与对照组相比:TG组细胞中NGAL（1.4367±0.8522）、ATF4（1.2124±0.6959）、CHOP（1.6902±1.0668）、GRP78（1.4277±1.0393）较对照组（NGAL 0.4908±0.4086,ATF4 0.3763±0.3252,CHOP 0.1471±0.1477,GRP780.... 

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 材料及试剂
    2.2 细胞培养
    2.3 实验方法
        2.3.1 构建内质网应激模型
        2.3.2 转染及构建转染后TG处理细胞模型
        2.3.3 免疫印迹检测(Western-blot)ATF4、CHOP、GRP78和NGAL蛋白的表达
        2.3.4 实时定量PCR技术(Real-time PCR)检测ATF4m RNA和 NGALm RNA的表达
        2.3.5 数据处理
    2.4 统计学分析
3 结果
    3.1 内质网应激对正常HK-2细胞的影响(见图2-15,见表1)
    3.2 转染ATF4-si RNA试剂对正常HK-2 细胞的影响(见图2-15,见表1)
    3.3 转染ATF4-si RNA试剂对应激HK-2 细胞的影响(见图2-15,见表1)
    3.4 溶剂DMSO对正常HK-2 细胞的影响(见图2-15,见表1)
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]内质网应激在急性肾损伤中的研究进展[J]. 刘杰,朱凯,杨定平.  临床肾脏病杂志. 2017(09)
[2]毒胡萝卜素诱导肾小管上皮细胞内质网应激后中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的变化[J]. 付晓鸥,侯玲,杜悦.  国际儿科学杂志. 2017 (05)
[3]脓毒症急性肾损伤相关指标间的关系[J]. 张辉,易著文,肖政辉,卢秀兰.  临床儿科杂志. 2015(12)
[4]中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、肾损伤分子1和白介素18在诊断心肺分流术后急性肾损伤中的意义[J]. 刘华杰,王平,沈云琳,李小兵,张儒舫,孙蕾,匡新宇,黄文彦.  临床儿科杂志. 2014(06)
[5]尿生物标志物在儿童急性肾损伤早期诊断中的作用研究[J]. 杜悦,侯玲,韩梅,赵成广,吴玉斌.  中国中西医结合肾病杂志. 2011(01)



本文编号：3691348