YAP通过Wnt/β-catenin信号通路促进BPD中Ⅱ型肺泡上皮细胞增殖和转分化的机制研究

发布时间：2023-03-31 22:22

　　目的:肺泡II型上皮细胞(alveolar epithelial type II cells,AECIIs)是肺组织中最关键的干细胞,在支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的恢复中起着重要作用。Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)作为Hippo信号通路下游关键的转录辅激活物,对各种干细胞生物学都有调节作用,可参与调节肺泡II型上皮细胞(AECIIs)的增殖和分化。YAP是关键的转录因子,可调控多条细胞信号通路的传导,而Wnt通路作为其中之一;而Wnt 3a/β-catenin介导的经典信号通路,在维持肺泡形态结构和肺泡上皮细胞增殖及转分化方面充当关键的作用。BPD是肺处于囊性发育阶段的早产儿常见的严重肺发育障碍,具有较高的病死率。病理上可表现出肺泡间隔增厚,肺泡结构简单化。那么YAP、Wnt3a和β-catenin在BPD病理条件下是否相关,以及它们的调控机制是什么?方法:将正常分娩的新生大鼠(连同母鼠)于生后24h内随机分为模型组和对照组,模型组放入85%的氧气中构建慢性肺损伤模型,对照组置于空气中,分别于...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 实验材料与方法
    2.1 实验试剂与仪器
        2.1.1 实验试剂
        2.1.2 实验仪器
    2.2 研究对象
    2.3 实验方法
        2.3.1 肺组织标本采集
        2.3.2 肺组织形态学
        2.3.3 细胞分离和培养
        2.3.4 细胞转染
        2.3.5 免疫荧光双染
        2.3.6 Western blot
        2.3.7 Real-time PCR
        2.3.8 免疫组化
        2.3.9 统计学分析
3 实验结果
    3.1 肺形态学
    3.2 PCR、Western blot方法检测SPC、AQP5 表达水平,通过检测上皮细胞标记物基因表达水平的改变,评估肺组织损伤情况
    3.3 PCR、Western blot方法检测肺组织中YAP、Wnt3a和β-catenin的表达水平,研究其在不同程度肺损伤中表达量的改变,探究其表达水平的变化与肺损伤间的关系
    3.4 免疫组织化学检测YAP、β-catenin蛋白的表达,明确其在肺组织中主要表达位置,及其表达水平的改变与肺组织损伤的关系
    3.5 免疫荧光双染检测SPC、AQP5、YAP、β-catenin在肺上皮细胞内的表达情况,明确其主要表达位置及其表达水平的改变
    3.6 在肺泡二型上皮细胞中YAP过表达和敲除的效
    3.7 YAP对 AECIIs增殖的影响
    3.8 YAP对 AECIIs向 AECIs转分化的影响
    3.9 YAP通过β-catenin影响Wnt/β-catenin信号通路,但不改变Wnt3a的表达
    3.10 Wnt3a通过β-catenin影响Wnt/β-catenin信号通路,而不是通过改变AECIIs中 YAP的表达
    3.11 过表达Wnt3a和敲减Wnt3a逆转了YAP对 AECIIs增殖和分化的影响
4 讨论
5 结论
本研究创新性自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3775899