腺病毒介导野生型p53基因转染左向右流型肺动脉高压大鼠的试验研究

发布时间：2023-04-01 15:14

　　目的研究重组腺病毒介导的野生型p53基因转染左向右分流型先心病肺动脉高压大鼠,观察转染后目的基因的表达情况,及其对肺动脉高压的抑制作用和对肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。 方法将pCMVp53重组转移载体经BamH1和NheI酶切,得到p53基因cDNA,然后将cDNA片段克隆到转移载体pCMV5GFP,使其受CMV5启动子的调控,获得pCMV5p53重组转移载体,用该线状重组转移载体与腺病毒右臂DNA经磷酸钙共转染293细胞获得重组腺病毒,经酶联免疫吸附法(ELISA)测定p53蛋白含量,证明外源p53基因在含重组腺病毒的293细胞中得到表达。同法创建对照组病毒Adeno-lacZ。48只大鼠随机分为4组:Ⅰ组(n=10)为空白对照组,仅做假手术处理;Ⅱ组(n=13)为模型对照组,通过套管法建立左向右分流型PH模型;Ⅲ组(n=14)为实验组,建立PH模型,并通过气管吸入法转染Adeno-p53重组腺病毒;Ⅳ组(n=11)为实验对照组,建立PH模型,并通过气管吸入法转染Adeno-lacZ重组腺病毒。16周后右心导管法测量各组大鼠右室平均压(mRVP)和肺动脉平均压(mPAP),计算...

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本文编号：3777371