lncRNA AARB07048878.1在ETU诱导的先天性肛门直肠畸形大鼠后肠发育中的作用研究

发布时间：2023-05-31 02:27

　　目的:先天性肛门直肠畸形是小儿外科常见的复杂消化道畸形,分型及病理改变复杂,治疗困难,严重影响患儿生命及预后。现阶段对于该疾病的研究多集中在基因水平,而对于基因的具体调控机制尚待进一步发现。本研究利用乙烯硫脲(ethylenethiourea,ETU)诱导先天性肛门直肠畸形大鼠模型,对末端后肠组织进行高通量测序,探索差异表达的lncRNA AARB07048878.1在肛门直肠畸形大鼠中的表达水平变化,通过对其进行干扰及过表达探索其在IEC-6细胞中的功能,推测其疾病发生中的作用。研究方法:①Wistar孕鼠42只分为ARM组和正常组,孕GD10分别按125mg/kg给予ETU及等量生理盐水灌胃,孕GD16、GD17、GD19剖宫取胎,转移至无菌操作环境下取材,GD16、GD17于显微镜下,GD19于肉眼下观察胎鼠骶尾部形态,计算胎鼠畸形率,对存在肛门闭锁、短尾或无尾畸形的胎鼠收集末端后肠组织。②利用荧光定量PCR技术检测ARM组及正常组胎鼠末段肛门直肠组织中的lncRNA AARB07048878.1表达水平差异。③设计lncRNAAARB07048878.1的特异性干扰序列Ribo...

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摘要
Abstract
英文缩略语
1前言
2 材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 细胞系
        2.1.3 实验主要试剂
        2.1.4 实验主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 动物模型制备及样品收集
        2.2.2 qRT-PCR检测组织中lncRNA AARB07048878.1 表达量
        2.2.3 质粒提取
        2.2.4 细胞培养
        2.2.5 细胞转染
        2.2.6 qRT-PCR检测细胞中lncRNA AARB07048878.1 表达量
        2.2.7 细胞增殖能力检测
        2.2.8 细胞凋亡检测
        2.2.9 Western blot检测细胞Wnt5a蛋白表达量
        2.2.10 统计学方法
3 结果
    3.1 动物模型制作和标本收集
    3.2 测序结果差异表达分析及筛选
    3.3 大鼠肛门直肠组织中lnc RNA AARB07048878.1 的表达
    3.4 lncRNA AARB07048878.1 干扰试剂及过表达质粒转染效率
    3.5 lncRNA AARB07048878.1对IEC-6 细胞增殖能力的作用
    3.6 lncRNA AARB07048878.1对IEC-6 细胞凋亡的作用
    3.7 lncRNA AARB07048878.1对Wnt5a表达的作用
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
文献综述
    参考文献
攻读学位期取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3825506