Smad4介导TGF-β2/BMP2信号对心脏发育相关基因组蛋白乙酰化修饰调控作用
发布时间:2024-01-09 07:43
第一部分: Smad4低表达对H9C2心肌细胞心脏发育相关转 录因子表达及其组蛋白乙酰化修饰的影响 目的 构建Smad4低表达的细胞模型,检测Smad4对心脏核心转录因子GATA4,MEF2c,Tbx5,Nkx2.5的表达的影响,并检测其对组蛋白H3乙酰化及这些基因启动子区组蛋白H3乙酰化水平的影响。以证实我们的科学假设:Smad4对组蛋白乙酰化修饰具有调节作用。 方法: (1)构建3条低表达Smad4的慢病毒载体,转染H9C2心肌细胞建立Smad4干扰的稳转细胞株,然后从蛋白水平检测Smad4蛋白的表达,检测其干扰效果,筛选出干扰效果最好的细胞株进行后续试验。 (2)实验分为正常对照组,阴性对照组(空载慢病毒组)和Smad4干扰组,实时荧光定量PCR检测三组心脏发育相关基因GATA4,NKX2.5,MEF2c,Tbx5,以及组蛋白乙酰化酶(HATs)亚型p300和GCN5的mRNA表达情况,Western-blotting检测乙酰化组蛋白H3(acH3)的表达, ChIP-Real-Time Q-PCR检测各处理组细胞GATA4,Nkx2.5,MEF2c,Tbx5启动子区组蛋白H3乙...
【文章页数】:129 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
英汉缩略语名词对照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 Smad4 低表达对 H9C2 心肌细胞心脏核心转录因子表达及其组蛋白乙酰化修饰的影响
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
4 结论
参考文献
第二部分 Smad4 介导 BMP2 信号通路对心肌细胞组蛋白乙酰化修饰的调控作用及其机制研究
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
4 结论
参考文献
第三部分 Smad4介导TGF-β2信号通路对心肌细胞组蛋白乙酰化修饰的调控作用及其机制研究
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
4 结论
参考文献
全文总结
文献综述
参考文献
致谢
攻读学位期间科研情况
本文编号:3877670
【文章页数】:129 页
【学位级别】:博士
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英汉缩略语名词对照
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 Smad4 低表达对 H9C2 心肌细胞心脏核心转录因子表达及其组蛋白乙酰化修饰的影响
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
4 结论
参考文献
第二部分 Smad4 介导 BMP2 信号通路对心肌细胞组蛋白乙酰化修饰的调控作用及其机制研究
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
4 结论
参考文献
第三部分 Smad4介导TGF-β2信号通路对心肌细胞组蛋白乙酰化修饰的调控作用及其机制研究
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
4 结论
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致谢
攻读学位期间科研情况
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