丹参诱导骨髓间充质干细胞神经性分化治疗新生鼠缺氧缺血性脑损伤

发布时间：2024-02-01 11:58

　　目的探讨丹参诱导骨随间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSC)分化为神经样细胞优化方案可行性及分化后的神经样细胞是否具有神经生理功能。 方法取4～5代状态好的MSC加入含10%胎牛血清(Fetal bovine serum, FBS)及10 ng/ml的碱性成纤维生长因子(basic Fibroblast Growth Factor, bFGF)的培养基预诱导24 h,更换为含60 mg/L丹参液和10 ng/ml bFGF的无血清培养基(诱导液)诱导2 h,加FBS(工作浓度为10%)进行去分化,约24 h后再次更换为诱导液诱导3 h,如此重复4⁵次,且每次诱导时间较前延长1 h,诱导后分别进行免疫荧光细胞化学,细胞膜电位(Membrane potential, MP)、细胞内钙流以及神经突触循环功能检测。以50 mmol/L的KCl作为诱发动作电位刺激因子,采用激光共聚焦显微镜(Laser-scanning confocal microscope, LSCM)对DiBAC4(3)、Fluo-3/AM、SynaptoRed C-2进行...

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图1丹参诱导MSC分化为神经样细胞优化方案流程图

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图2培养2天的原代MSC，细胞呈短梭形，小集落分布（倒置相差显微镜,100×）

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图3培养7天的原代MSC，细胞呈成纤维样，漩涡状排列.

图1丹参诱导MSC分化为神经样细胞优化方案流程图Fig1TheflowchartoftheprocedurethatMSCwasinducetodifferentiatedintoneuron-likecellsbysalviamilto....

图4第4代的MSCs，细胞呈成纤维样，漩涡列.（倒置相差显微镜，100×）

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本文编号：3892078