MTHFR启动子区域甲基化状态与先天性心脏病的关系

发布时间：2025-01-14 06:59

　　目的目前我们对先天性心脏病(congenital heart diseases, CHDs)的发病原因和机制了解还很少,部分文献表明5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetrahydrofolate reductase, MTHFR)基因单核苷酸多态性( single nucleotide polymorphisms ,SNPs)与CHDs的发生有关,但也有文献显示基因MTHFR启动子区域超甲基化可能在CHDs的发病中起了重要作用。本研究通过比较CHDs患儿与无出生缺陷的正常儿童MTHFR启动子区域甲基化状态,旨在了解MTHFR启动子区域甲基化状态与CHDs的关系。 方法收集先天性心脏病(CHDs)儿童外周静脉血液标本53例,无先天性出生缺陷的正常儿童血液标本80例,提取外周血白细胞DNA,然后对DNA进行亚硫酸氢钠修饰,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术通过特异性引物检测MTHFR基因启动子区域CpG岛甲基化状态,分析MTHFR基因启动子区域甲基化状态与先天性心脏病的关系。 结果MSP分析显示,MTHFR基因启动子区域在病例组中完全甲基化率(2/53,...

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【部分图文】：

图1.包括解剖学和生理学两个层面的心脏畸形发病率

5图1.包括解剖学和生理学两个层面的心脏畸形发病率[8]叶酸是甲硫氨酸再生成以及后续S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成的关键因子，而SAM是DNA甲基化、生成嘌呤和嘧啶以及DNA合成与修复的甲基供体，因此叶酸的缺乏或者代谢异常将会通过核酸甲基化、DNA的整合与修复等途....

图2.MTHFR在叶酸代谢及甲硫氨酸循环中的作用[15]

也可能包括其他先天性出生缺陷[11]，如CHDs，可能会影响到心脏和血管系统发育相关基因的功能。MTHFR不仅是脱氧尿苷一磷酸向胸腺嘧啶转化的辅助因子，而且对DNA的合成也至关重要[12,13]。可见，MTHFR维持着核酸合成和甲硫氨酸合成对叶酸利用的平衡，因为它的底物....

图3.MSP实验原理示意图

饰后的基因序列的扩增，亚硫酸氢钠修饰后的基因序列进行引物设计可rimer引物设计软件或在线设计[28]。针对MTHFR基因启动子区域，我们物序列，这两对引物通过上述软件进行设计，对MTHFR启动子区域甲分析。引物序列如下：Methylated)THFRmetF5'-A....

图4.MSP产物凝胶成像结果

18图4.MSP产物凝胶成像结果注：A、B为对照组；C、D为病例组M表示甲基化；U表示非甲基化Marker：50bp；Marker1：100bp(A)对照组中检测到完全非甲基化序列69例，占所有对照组标本的86.25%(B)对照组中检测到2例完全甲基化....

本文编号：4026578