贵阳市500例儿童人偏肺病毒感染特征调查研究

发布时间：2017-06-03 11:05

  本文关键词：贵阳市500例儿童人偏肺病毒感染特征调查研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分荧光定量PCR检测儿童NPA人偏肺病毒方法的建立目的:观察比较实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法与普通反转录酶-聚合酶链锁反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测人偏肺病毒(human Metapneumovirus,h MPV)的特异性、灵敏性,以建立能准确定量检测儿童深部鼻咽吸取物(nasopharyngeal aspirate,NPA)h MPV感染的分子生物学检测方法。方法:用DNAstar软件分析h MPV原型株及亚型的基因片段,找出相对保守的基因位点,根据保守基因位点分别设计出针对h MPV F基因的引物及探针,建立检测h MPV F基因的Real-time PCR方法,并同时根据引物设计原则设计RT-PCR的引物,对两种方法的特异性、灵敏性、重复性以及是否实用于儿童深部鼻咽吸取物h MPV感染的检测等指标进行比较评价。结果:Real-time PCR方法能够特异性的的检测儿童深部鼻咽吸取物h MPV,并且能进行定量分析,定量的敏感度可达到102拷贝,比较Real-time PCR方法与RT-PCR方法,其检出率分别为16%及9.8%,相对于Real-time PCR,RT-PCR的灵敏度及特异度分别为31.3%及94.3%。结论:Real-time PCR检测h MPV敏感性明显高于RT-PCR方法,为临床开展儿童深部鼻咽吸取物h MPV感染的定量检测及贵阳地区h MPV感染流行病学调查建立了有效的分子生物学检测方法。第二部分贵阳市500例儿童人偏肺病毒感染特征调查研究目的:采用已建立的Real-time PCR方法检测贵阳地区儿童急性下呼吸道感染(Acute lower respiratory tract infections,ALRTI)住院患儿人偏肺病毒(human Metapneumovirus,h MPV)感染情况,并对h MPV感染的流行病学特点和临床特征进行总结分析。方法:收集2014年1月~2014年12月全年间500例ALRTI患儿深部鼻咽吸取物(nasopharyngeal aspirate,NPA)和2ml静脉血标本,Real-time PCR方法对NPA进行h MPV F基因检测,阳性标本扩增产物行核苷酸序列测定,同时取NPA进行细菌培养,并采用间接免疫荧光方法对血标本进行7种常见呼吸道病毒病原检测,收集病例临床资料进行统计分析。结果:500例NPA标本中共检测到80例实时Real-time PCR阳性,阳性率16%,阳性标本测序结果与Gene Bank中h MPV同源性达91%-99%。80例h MPV阳性患儿中,感染年龄0~6岁,其中1岁以下感染率最高,6岁以上合并基础疾病患儿也易受h MPV感染;h MPV流行特点为全年散发,发病高峰出现在2/3/5/6/12月;h MPV感染后喘息症状发生率较高;h MPV可协同感染其它呼吸道病原体,当h MPV患儿协同其他病原感染时,部分病例病情较重,可表现为重症肺炎。结论:h MPV是贵阳地区儿童患者急性下呼吸道感染的重要的病原体之一。
【关键词】：荧光定量PCR 普通反转录酶-聚合酶链锁反应 人偏肺病毒 儿童 急性下呼吸道感染 人偏肺病毒
【学位授予单位】：贵阳医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R725.6
【目录】：

• 摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 缩略词表10-11
• 引言11-12
• 第一部分 荧光定量PCR检测儿童NPA人偏肺病毒方法的建立12-28
• 前言12-13
• 1.研究对象13-19
• 2.材料与方法19-23
• 3.讨论23-25
• 4.小结25-26
• 参考文献26-28
• 第二部分 贵阳市500例儿童人偏肺病毒感染特征调查研究28-48
• 前言28
• 1.材料与方法28-34
• 2.结果34-41
• 3.讨论41-44
• 4.小结44-45
• 参考文献45-48
• 综述48-58
• 参考文献54-58
• 作者简历58-59
• 致谢59-60
• 学位论文集60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

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本文编号：417963