卡介苗多糖核酸对哮喘大鼠肺组织STAT3、IL-21表达的影响
发布时间：2017-06-28 17:18
本文关键词：卡介苗多糖核酸对哮喘大鼠肺组织STAT3、IL-21表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：目的 通过建立大鼠慢性哮喘模型，观察卡介苗多糖核酸（polysaccharid nucleicacidfraction of BCG, BCG-PSN）对哮喘大鼠肺组织信号转导及转录活化因子3（SignalTransducer and Activator of Transc, STAT3）及白细胞介素-21（Interleukin, IL-21）表达的影响。 方法 1.40只清洁健康，约1月龄，体重150-170克的雄性SD大鼠，随机分配为以下四个组别：正常对照组（Control组）、哮喘模型组（Model组）、地塞米松干预治疗组（Dexamethasone，，DXM组），布地奈德混悬液干预治疗组（Budesonide，BUD组），每组各10只。 2. Model组、DXM组、BCG-PSN组大鼠分别于实验第1天、第15天腹腔注射10㳠卵清蛋白(Ovalbumin，OVA)溶液1毫升，包含免疫佐剂氢氧化铝100毫克，实验第22天，用2㳠卵清蛋白溶液4毫升对大鼠进行雾化吸入激发，每次约20分钟，隔天雾化1次，连续共9周。 3.DXM组（0.3mg/kg）、BCG-PSN组（0.45mg/kg）在实验开始后腹腔注射，3次/周，时间共为12周；Control组及Model组给予生理盐水腹腔注射，3次/周，时间共为12周。 4.实验第12周末，四组大鼠分别予以水合氯醛腹腔注射麻醉后用肺功能检测气道阻力变化，检测完成后用腹主动脉放血方法处死大鼠，分别取各组左右两侧肺组织，其中左肺组织作实时荧光定量聚合酶连锁反应法（quantitative real-time PCR，qPCR）来检测肺组织STAT3与IL-21mRNA的转录水平，并通过Western Blot检测方法检测大鼠肺组织中STAT3的蛋白表达水平；右侧肺组织通过病理HE染色方法对各组大鼠肺组织进行形态学观察，分析四组大鼠中气道炎症的变化情况。 结果 1.慢性哮喘大鼠模型的建立：实验第22天开始予以2㳠卵清蛋白溶液雾化吸入后逐渐出现以下哮喘发作症状：面部搔抓、呼吸频率加快、点头呼吸、面部紫绀，大小便失禁等，于实验第12周末予动物肺功能检测其气道阻力变化，结果提示Model组大鼠气道阻力明显增高，与Control组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；病理HE染色肺组织切片形态学发现：Model组肺组织中支气管与肺泡周围炎症细胞明显增高，嗜酸性粒细胞增多，气道内有较多粘性分泌物，支气管管壁增厚导致管腔狭窄，提示慢性哮喘大鼠模型构建成功。 2.BCG-PSN干预后大鼠肺组织病理学与气道阻力测定：哮喘大鼠经BCG-PSN干预后病理组织学改变，BCG-PSN组仍可见炎症反应，与Model组比较炎症减轻；与DXM比较，差异不显著；但与Control组比较仍可见炎症反应。四组大鼠均以不同浓度盐酸组胺激发。相同浓度盐酸组胺激发下， BCG-PSN组气道阻力与Model组比较，气道阻力明显下降，有统计学意义(P＜0.05)；与Control组比较，气道阻力仍然增高，有统计学意义(P＜0.05)；与DXM组比较，无统计学意义。 3.BCG-PSN干预后肺组织STAT3和IL-21表达量的变化：BCG-PSN干预后哮喘大鼠肺组织STAT3、IL-21mRNA转录较Model组下降，差异均有统计学意义(P＜0.05)；但较Control组明显增高，差异均有统计学意义(P＜0.05)；与DXM比较差异无统计学意义。BCG-PSN干预组STAT3蛋白表达量较Model组比较显著降低，差异有统计学意义(P＜0.05)；但较Control组明显增高，差异有统计学意义(P＜0.05)；与DXM比较差异无统计学意义。 结论 1.通过OVA致敏，激发，能成功构建大鼠慢性哮喘模型。STAT3、IL-21在大鼠肺组织中高表达，参与了哮喘发病。 2.BCG-PSN能降低哮喘大鼠气道高反应性、减轻气道炎症。 3.BCG-PSN能抑制哮喘大鼠STAT3、IL-21蛋白表达，提示BCG-PSN的干预作用与下调肺组织STAT3、IL-21的表达有关。
【关键词】：卡介苗多糖核酸 哮喘 动物模型 IL-21 STAT3
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R725.6
【目录】：
- 中文摘要4-7
- Abstract7-10
- 英文缩略词表10-11
- 前言11-13
- 1 实验材料与实验方法13-24
- 1.1 实验材料13-15
- 1.2 实验方法15-24
- 2 结果24-33
- 2.1 大鼠哮喘样症状的观察24
- 2.2 大鼠气道阻力测定24-25
- 2.3 各组大鼠肺组织的病理变化25-26
- 2.4 qPCR 检测大鼠肺组织中 STAT3 mRNA 转录的表达26-28
- 2.5 qPCR 检测大鼠肺组织中 IL-21 mRNA 转录的表达28-31
- 2.6 Western Blotting 检测大鼠肺组织 STAT3 蛋白的表达31-33
- 3 讨论33-37
- 3.1 大鼠慢性哮喘模型的构建33-34
- 3.2 STAT3 对哮喘大鼠发病过程的影响34-35
- 3.3 IL-21 对哮喘大鼠发病过程的影响35-36
- 3.4 BCG-PSN 对哮喘大鼠的免疫调节作用36-37
- 4 结论37-39
- 参考文献39-44
- 综述44-52
- 参考文献48-52
- 致谢52-53
- 攻读学位期间主要研究成果53
【参考文献】
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本文编号：494694
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