组织激肽释放酶8在宫内感染脑白质损伤仔鼠海马及血清中的表达

发布时间：2017-08-05 00:02

  本文关键词：组织激肽释放酶8在宫内感染脑白质损伤仔鼠海马及血清中的表达

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【摘要】：目的： 本实验通过孕鼠腹腔注射脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）构建宫内感染脑白质损伤仔鼠模型，观察组织激肽释放酶8（Kallikrein8,Neuropsin，KLK8）在仔鼠海马及血清中的表达变化，以探讨宫内感染仔鼠发生脑白质损伤的机制。 方法： 选取健康三月龄SD大鼠（Sprague-Dawley大鼠）52只，按照雌雄1：1的比例交配。受孕成功的孕鼠随机分为正常对照组（对照组）和宫内感染组（感染组）；孕18天时，感染组孕鼠连续2天腹腔注射LPS，建立宫内感染致脑白质损伤仔鼠模型；对照组孕鼠注射同等剂量的生理盐水。两组孕鼠均正常饮食喂养及自由饮水，仔鼠生后由母鼠哺乳喂养，选择生后1日龄、3日龄、7日龄和14日龄4个时间点，每个时间点每组有9只仔鼠，，测量仔鼠出生体重及各个时间点时的体重、脑重，在各个时间点9只仔鼠中随机选取3只仔鼠取脑组织进行HE染色观察脑组织形态，其余6只留取海马组织，两侧分别用Western blot及RT-PCR检测海马组织中组织激肽释放酶8的动态表达，同时检测血清中组织激肽释放酶8的表达水平。 结果： 1、两组大鼠体重及脑重的动态比较：感染组出生时及1日龄时体重降低（P＜0.05），到3日龄、7日龄、14日龄时体重与对照组无明显差异（P＞0.05）；感染组1日龄仔鼠脑重降低（P＜0.01），到3日龄、7日龄、14日龄时脑重与对照组无明显差异（P＞0.05）。 2、两组大鼠脑组织HE染色的变化：感染组SD大鼠生后1天、3天脑组织切片可见组织疏松、水肿；生后7天及14天脑白质染色淡，结构疏松呈筛网状，细胞数减少。同时感染组还有脑室内出血、脑白质血管扩张、毛细血管破裂出血等现象。对照组仔鼠脑组织切片见脑室周围白质区域无明显水肿，无明显细胞减少。 3、两组大鼠海马组织中组织激肽释放酶8的动态表达：在四个时间点，1日龄时，两组大鼠组织激肽释放酶8的表达均低，3日龄时表达增加，7日龄和14日龄时明显表达；Western blot及RT-PCR检测发现与对照组相比，在1日龄、3日龄及7日龄时感染组仔鼠组织激肽释放酶8的表达均高于对照组（P＜0.05）。到14日龄时两组表达无明显差异（P＞0.05）。 4、血清组织激肽释放酶8表达水平比较：四个时间点，在1日龄时表达最低，随着日龄渐增加，到7日龄与14日龄时明显表达；两组比较，在1日龄、3日龄及7日龄时感染组仔鼠较对照组高（P＜0.05），到14日龄时两组表达无明显差异（P＞0.05）。 5、组织激肽释放酶8血清表达水平与Western blot半定量检测海马中蛋白量的相关性分析：海马组织中KLK8表达的值与血清浓度值之间均呈正相关关系，直线等级相关系数为0.759(P0.01)。 结论： 1、孕鼠腹腔注射LPS能建立宫内感染大鼠脑白质损伤模型。 2、孕鼠腹腔注射LPS建立的宫内感染脑白质损伤仔鼠，出生时体重、脑重低，生后脑白质染色淡，结构疏松呈筛网状，细胞数减少，并有脑室内出血、脑白质血管扩张、毛细血管破裂出血等现象。 3、宫内感染脑白质损伤仔鼠组织激肽释放酶8在海马及血清中的表达量于仔鼠脑白质受损高峰期（3天、7天）高于对照组，提示其可能参与宫内感染仔鼠发生脑白质损伤的机制。
【关键词】：宫内感染 组织激肽释放酶8 脑白质损伤
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R722.6
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-22
• 结果22-30
• 讨论30-36
• 结论36-37
• 参考文献37-40
• 综述40-52
• 参考文献47-52
• 中英文对照缩略词表52-53
• 攻读学位期间发表的论文53-54
• 致谢54-55

【参考文献】

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本文编号：622283