IL-33在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的作用研究

发布时间：2017-10-23 17:24

  本文关键词：IL-33在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的作用研究

  更多相关文章： 慢性阻塞性肺疾病 白细胞介素-33 ST2 IL-1受体辅助蛋白 慢性阻塞性肺疾病 白细胞介素-33 ST2 香烟烟雾提取物 人支气管上皮细胞 慢性阻塞性肺疾病 白细胞介素-33 ST2 香烟烟雾提取物 人支气管上皮细胞 TLR4

【摘要】：目的：慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种肺部慢性炎症性疾病,其特征是炎症细胞活化和炎症介质的释放。白细胞介素-33(IL-33)是具有免疫调节作用的白细胞介素-1(IL-1)家族新成员,在各种炎症和免疫疾病中起着重要作用,但IL-33是否参与COPD发病机制仍不清楚。本部分实验目的在于探讨IL-33及其受体ST2和IL-1受体辅助蛋白(IL-1RAcP)在COPD患者中的表达水平。 方法：应用酶联免疫吸附法检测112例COPD患者和115例对照组血浆IL-33、ST2、IL-1RAcP的浓度,并用流式细胞术检测外周血细胞IL-33表达情况；将12例因肺部非肿瘤性疾病行肺叶切除术患者按肺功能情况分为COPD组(6例)和对照组(6例),用免疫荧光染色法检测气道IL-33的表达情况,并用Western Blot方法对气道组织中IL-33蛋白水平进行分析。 结果：与对照组相比,COPD组血浆IL-33、ST2、IL-1RAcP浓度均升高,外周血中IL-33主要由淋巴细胞表达,COPD组IL-33阳性淋巴细胞比例明显高于对照组,中性粒细胞中IL-33阳性比例较低,两组无显著性差异。IL-33在肺内主要表达在气道上皮细胞,COPD组平均荧光强度高于对照组,且COPD组气道组织中IL-33蛋白水平较对照组明显升高。 结论：IL-33、ST2和IL-1Racp在COPD患者中的表达均升高,且IL-33主要来源于外周血淋巴细胞和气道上皮细胞。 目的：吸烟是COPD发病的重要危险因素,香烟中的有害成分刺激机体产生多种炎症介质,参与COPD的发生和进展,香烟烟雾是否可以直接诱导IL-33的表达尚不清楚,因此,研究香烟烟雾对IL-33表达和释放的影响是本部分实验的目的。 方法：12只小鼠随机被分为对照组和熏烟组；熏烟组小鼠分别暴露于香烟烟雾中8个月,用HE染色法观察肺组织形态学改变,Real-time PCR法检测小鼠PBMCs中IL-33和ST2的转录,ELISA方法检测小鼠血浆IL-33和ST2的释放,Western Blot法检测小鼠气道中IL-33的蛋白表达量；培养HBE细胞,分成4组：对照组(CM组),CSE组,LPS组,CSE+LPS组；Western Blot法检测各组IL-33的表达水平,ELISA方法检测细胞培养上清中IL-33水平,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞的损伤和凋亡。 结果：与对照组相比,熏烟组小鼠肺泡间隔破坏明显；熏烟组小鼠PBMCs的IL-33和ST2基因转录水平和血浆IL-33和ST2浓度较对照组升高,熏烟组小鼠气道中IL-33的蛋白表达也明显升高；另外,体外细胞实验证实CSE和LPS能够刺激HBEs IL-33表达增加,细胞培养上清中IL-33的浓度也呈现相应的增高趋势。 结论：吸烟可以刺激IL-33在机体内的表达和释放,在体外条件下,CSE和LPS能够促HBE中IL-33表达和释放。 目的：探讨TLR4是否参与调节香烟烟雾致IL-33的表达,研究TLR4基因单核苷酸多态性与吸烟者IL-33的差异表达的关系。 方法：24只小鼠随机分为4组：对照组,TAK242腹腔注射组,香烟烟雾暴露组,TAK242腹腔注射+香烟烟雾暴露组,每组6只；Western blot法检测TLR4和IL-33在小鼠气道中的蛋白表达量,Real-time PCR法检测小鼠PBMCs TLR4和IL-33基因的转录水平；培养HBE细胞,分成6组：对照组,TAK242组,CSE组,CSE+TAK242组,LPS组,LPS+TAK242组,Real-time PCR法和Western Blot法检测各组IL-33和TLR4的基因转录和蛋白表达。测序法检测20例吸烟健康者和20例吸烟COPD患者中TLR4基因rs4986790、rs4986791和rs11536889位点多态性。 结果：动物实验中,与对照组相比,小鼠气道组织中TIL4和IL-33的蛋白表达水平在S组显著升高,小鼠PBMCs TLR4和IL-33的基因转录水平在S组也明显升高,且TAK242可以明显抑制香烟烟雾暴露小鼠气道和PBMCs中IL-33的表达。体外细胞培养实验中,与对照组比较,CSE可以诱导HBEs TLR4mRNA转录和蛋白表达水平增加,且TAK242可以明显抑制CSE和LPS诱导的IL-33表达。TLR4基因单核苷酸多态性检测结果显示：在所有研究对象中,rs4986790位点和rs4986791位点均未发现等位基因,健康吸烟者组和COPD患者组之间rs11536889位点等位基因的频率无显著性差异,两组中来自rs11536889位点GG基因型的受试者与来自CG基因型的受试者血浆IL-33蛋白水平比较均未见显著性差异。 结论：TLR4参与香烟烟雾诱导的IL-33表达调控,TLR4基因单核苷酸多态性可能与吸烟者IL-33的差异表达无关。
【关键词】：慢性阻塞性肺疾病 白细胞介素-33 ST2 IL-1受体辅助蛋白 慢性阻塞性肺疾病 白细胞介素-33 ST2 香烟烟雾提取物 人支气管上皮细胞 慢性阻塞性肺疾病 白细胞介素-33 ST2 香烟烟雾提取物 人支气管上皮细胞 TLR4
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R563.9
【目录】：

• 前言7-10
• 中文摘要10-13
• ABSTRACT13-17
• 第一部分 白介素-33及其受体在慢性阻塞性肺疾病患者中的表达变化17-38
• 1. 材料和方法18-26
• 2. 结果26-27
• 3. 讨论27-30
• 参考文献30-34
• 图表34-38
• 第二部分 香烟烟雾促进慢性阻塞性肺疾病中IL-33的表达和释放38-56
• 1. 材料和方法39-46
• 2. 结果46-47
• 3. 讨论47-49
• 参考文献49-51
• 图表51-56
• 第三部分 TLR4在香烟烟雾致IL-33表达增高中的作用56-77
• 1. 材料和方法57-65
• 2. 结果65-66
• 3 讨论66-69
• 参考文献69-72
• 图表72-77
• 综述 IL-33在疾病中作用的研究进展77-89
• 参考文献83-89
• 附录1 英文缩略词表89-90
• 附录2 攻读博士学位期间发表的论文90-91
• 致谢91

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 刘晓萃;刘晓斐;陈兵;何守志;;IL-33在β-淀粉样蛋白刺激视网膜色素上皮细胞中的表达及作用研究[J];现代免疫学;2014年01期

2 张恒超;房林;;IL-33在急性胰腺炎大鼠血清中的变化及意义[J];同济大学学报(医学版);2010年05期

3 宋向凤;田中伟;;IL-33与皮肤炎症性疾病关系的研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;2014年09期

4 周全;吴熊焰;刘炳亚;苏丽萍;;IL-33及其受体与肿瘤发生、发展关联性的研究进展[J];外科理论与实践;2013年06期

5 孙海斌;王晓蕾;郁敏;金未来;;急性免疫性血小板减少症患儿血清IL-33检测及其意义[J];现代免疫学;2012年06期

6 宿晓东;李军;王国芳;石俊强;于珊珊;;IL-33研究进展[J];济宁医学院学报;2012年03期

7 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前4条

1 贺新良;赵建平;;IL-33对哮喘小鼠外周血淋巴细胞分泌Th1/Th2细胞因子的影响[A];中华医学会呼吸病学年会——2011（第十二次全国呼吸病学学术会议）论文汇编[C];2011年

2 于磊;王周;窦伟;刘康;范维玲;刘泗宝;陆丽芳;寇东霞;李振;;患者血清IL-33和MMP12水平与颈动脉粥样硬化斑块稳定性及脑梗死的关系[A];山东省2013年神经内科学学术会议暨中国神经免疫大会2013论文汇编[C];2013年

3 胡朝梁;谢俊刚;赵建平;;TNF-α和LPS对哮喘患者外周血单个核细胞IL-33分泌的影响[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年

4 程龙献;;ST2信号转导通路IL-33、ST2和IL1RAP基因多态性与冠心病易感性研究[A];中华医学会第十五次全国心血管病学大会论文汇编[C];2013年

中国博士学位论文全文数据库 前4条

1 夏杰;IL-33在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的作用研究[D];华中科技大学;2015年

2 刘晓萃;IL-33在β-淀粉样蛋白刺激视网膜色素上皮细胞中的表达及作用机制研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年

3 陈力航;IL-18,IL-33对Th1,Th2细胞因子的表达调控在原发免疫性血小板减少症发病中的作用[D];复旦大学;2013年

4 高虹;IL-33在神经系统的表达及参与痛觉调制的研究[D];苏州大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前7条

1 文雯;白细胞介素33（IL-33）在肿瘤组织的表达及其抗肿瘤作用的初步研究[D];苏州大学;2015年

2 章颖妹;IL-33蛋白在慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中表达及意义[D];安徽医科大学;2015年

3 陈海花;慢性阻塞性肺疾病患者血清IL-33及sST2的活性及意义[D];中南大学;2013年

4 张yN;冠心病患者血清IL-33水平的研究[D];中南大学;2010年

5 黄灿辉;警报素IL-33介导狼疮肾炎炎症损伤的研究[D];广州医科大学;2014年

6 郑瑞兵;CpG ODN对哮喘小鼠气道黏液高分泌及IL-33表达水平的影响[D];福建医科大学;2012年

7 郑梦凝;血清IL-17、IL-18、IL-33在OSAHS及其合并高血压患者血清的变化及意义[D];遵义医学院;2014年

，

本文编号：1084544