AKT信号转导途径在尼古丁促进大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用

发布时间：2017-10-23 21:38

  本文关键词：AKT信号转导途径在尼古丁促进大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用

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【摘要】：目的探讨AKT信号途径在尼古丁诱导大鼠气道平滑肌细胞增殖中发挥的作用。方法 (1)Western blot检测不同浓度尼古丁作用原代培养的大鼠气道平滑肌细胞不同时间段,AKT/磷酸化AKT、GSK3β/磷酸化GSK3β在气道平滑肌细胞上的表达水平;(2)细胞分析计数仪检测AKT抑制剂和GSK3β抑制剂对尼古丁促进大鼠气道平滑肌细胞增殖活性的影响。实验分组:对照组、尼古丁单独作用组、AKT抑制剂LY294002组、AKT抑制剂LY294002+尼古丁组、GSK3β抑制剂SB216763组、GSK3β抑制剂SB216763+尼古丁组;(3)EDUd{入法测定AKT抑制剂和GSK3β抑制剂对尼古丁处理大鼠气道平滑肌细胞DNA复制活性的影响,实验分组同上。对照组应用1%胎牛血清培养基,各抑制剂和尼古丁应用1%胎牛血清培养基配制,分别在尼古丁加入前30 min应用。结果 (1)大鼠气道平滑肌细胞上有AKT和GSK3β的表达;尼古丁引起AKT和GSK3β的快速磷酸化,且尼古丁促进AKT和GSK3β的磷酸化作用具有时间依赖性;(2)细胞计数法显示,AKT抑制剂与尼古丁联合组细胞计数明显低于尼古丁单独作用组,差异有统计学意义(P0.05);(3)EDUd{入法测定显示,AKT抑制剂与尼古丁联合组细胞DNA复制水平明显下降,与尼古丁单独作用组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论尼古丁促进大鼠气道平滑肌细胞的增殖作用依赖AKT/GSK3β信号途径。
【作者单位】： 广州医科大学形态学实验中心;广州医科大学附属第一医院、呼吸疾病国家重点实验室;
【关键词】： 尼古丁 大鼠气道平滑肌细胞 AKT信号途径 细胞增殖
【基金】：广州医科大学博士、留学回国人员科研项目(编号:2013C09)
【分类号】：R56
【正文快照】： 510120)慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)是一种具有气流受限特征的可以预防和治疗的疾病。其气流受限不完全可逆、呈进行性发展,与肺脏对吸入烟草烟雾等有害气体或颗粒的异常炎症反应有关[1]。慢阻肺发病与多种因素有关[2],吸烟是导致慢阻肺的最主要原因,流行病学资料显示,长期吸烟

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本文编号：1085522