IL-27干预博来霉素诱导的小鼠肺纤维化进程的实验研究

发布时间：2017-11-06 06:17

本文关键词：IL-27干预博来霉素诱导的小鼠肺纤维化进程的实验研究

【摘要】：研究目的：通过给予博来霉素诱导的肺纤维化小鼠分组分别注射白介素27重组蛋白(rmIL-27)和白介素27抗体重组蛋白(Anti IL-27Ab),观察IL-27重组蛋白和IL-27抗体对小鼠生存情况、肺泡炎症、纤维化程度、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白的影响。研究方法： 1.将80只6-8周龄18-22g C57BL/6小鼠随机分为正常组(A组)、BLM模型组(B组)、BLM+IL-27组(C组)、BLM+抗IL-27组(D组),每组各20只。 2小鼠麻醉后A组给予气管内一次性注入生理盐水0.05m1,B.C.D组小鼠气管内一次性注入生理盐水稀释的博来霉素溶液0.05m1(5mg/kg),以复制肺纤维化模型,C组造模后第二天开始腹腔皮下注射小鼠IL-27重组蛋白溶液1μg/只·天,连续注射7天,D组造模后当天一次性腹腔皮下注射小鼠抗IL-27蛋白溶液200mg/只。饲养于动物房内。 3.观察对比A、B组小鼠肺组织IL-27.IL-27R的mRNA荧光定量 4.观察各组小鼠生长情况、死亡率、生存情况。 5.各组分别于第7天、第28天各处死小鼠5只,获取肺组织,病理学方法观察各组小鼠肺组织肺泡炎症和肺纤维化程度,测定肺组织羟脯氨酸含量,RT-PCR检测小鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA荧光定量。 6.B、C、D组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA相对表达量与肺纤维化相关性研究研究结果： 1.IL-27、IL-27R在肺纤维化模型肺组织中明显升高(P0.05)。 2.各组小鼠在28天时D组自然死亡率最高(75%),B组其次(500%),C组死亡率更低(30%),A组无小鼠死亡,差异具有统计学意义(P0.05)。 3.病理结果提示：第7天D组肺泡炎和肺纤维化程度最重,B组其次,C组最轻(P0.05)；第28天B组肺纤维化程度较C组加重(P0.05),两组肺泡炎无差异(P0.05)；B、C组28天肺纤维化程度较7天均加重(P0.05)；D组小鼠在18天全部死亡,未获得28天肺组织,不能比较；A组肺组织无肺泡炎和肺纤维化。 4.羟脯氨酸含量变化：第7天D组肺组织羟脯氨酸含量最高,B组其次,C组含量最少,差异有统计学意义(P0.05)；第28天B组肺组织羟脯氨酸含量较C组更高(P0.05);B、C组28天羟脯氨酸含量均较7天升高(P0.05)；D组小鼠在18天全部死亡,未获得28天肺组织,不能比较；各组各时间点羟脯氨酸含量均较A组升高(P0.05)。 5.Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA相对表达量：以A组肺组织的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达量作为1.00,各组各时间点、Ⅲ型胶原蛋白mRNA相对表达量均较A组升高(P0.05)；第7天Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA相对表达量D组最高,B组其次,C组最低(P0.05)；第28天Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA相对表达量B组最高,C组其次(P0.05)；B、C组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA相对表达量第28天均较7天升高(P0.05),A组无变化。 6.相关性分析：第7天各组肺纤维化计分与Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA相对表达量均成正相关(r=0.924,P0.05；r=0.848,P0.05)；第28天各组肺纤维化计分与Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA相对表达量均成正相关(r=0.821,P0.05；r=0.924,P0.05) 研究结论： 1.IL-27、IL-27R在博来霉素诱导的肺纤维化组织中明显升高,IL-27可能参与了肺纤维化的进程。 2.IL-27能够减轻博来霉素诱导的小鼠肺泡炎症,抑制肺纤维化的进程,对肺纤维化起保护作用。 2.IL-27能够降低肺纤维化小鼠的死亡率、提高生存率。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R563

【参考文献】

中国期刊全文数据库前10条

1 姚鲁肃;吕长俊;王晓芝;钱知勉;;IL-10对TGF-β刺激成纤维细胞转化的影响[J];滨州医学院学报;2009年03期

2 陈杰;袁岳沙;李琦;刘梅;周少华;靳伟;;IL-27对哮喘患儿IFN-γ及IL-4的调节作用[J];中国当代儿科杂志;2010年07期

3 赵云峰;熊伟;张梅;吴学玲;;IL-27对哮喘小鼠血清IgE的影响[J];成都医学院学报;2013年01期

4 于华平;谢军;;转化生长因子β_1在皮肌炎皮肤组织中的表达[J];西南军医;2011年02期

5 孟婕;彭张哲;陶立坚;;小剂量多次尾静脉注射与气管内滴注博来霉素致小鼠肺纤维化模型的比较研究[J];中南大学学报(医学版);2013年12期

6 刘金苹;翟乃亮;范贤明;高福泉;王晓芝;;JAK/STAT1信号转导通路在博莱霉素致肺纤维化大鼠中的作用[J];山东医药;2008年34期

7 拉杰,于玫;哮喘发病机理及Th1/Th2比例的关系[J];天津医科大学学报;2002年03期

8 陶章;李惠萍;;不同剂量博莱霉素致小鼠肺纤维化模型的比较[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年07期

9 金晓光;代华平;庞宝森;牛淑洁;李雪;吕_g;王辰;;博来霉素致大鼠肺纤维化模型肺组织的动态病理变化及其发生机制[J];中国病理生理杂志;2009年04期

10 刘丽华;单保恩;王士杰;赵连梅;;IL-27通过上调MIG和IP-10的表达抑制肿瘤血管形成[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2009年01期