重组水蛭素对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重塑的影响及机制研究

发布时间：2018-01-14 02:07

  本文关键词：重组水蛭素对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重塑的影响及机制研究　出处：《西南医科大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:通过观察重组水蛭素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠小气道壁厚度、平滑肌和胶原厚度以及支气管肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)表达的影响,探讨重组水蛭素对COPD大鼠气道重塑的作用及其可能机制。方法:将30只健康SD雄性大鼠,随机分为对照组、模型组、干预组,每组10只。模型组和干预组在第1、15日气管内注入脂多糖(LPS)200μl,第2~14日及16~28日每日2次香烟烟熏,建立COPD大鼠模型。对照组第1、15日气管内注入生理盐水200μl。干预组每日皮下注射300μl重组水蛭素液(含重组水蛭素1.5mg/Kg)1次,而对照组和模型组每日皮下注射300μl生理盐水1次。观察大鼠一般状况;测定支气管肺泡灌洗液(BALF)的细胞总数和分类;苏木精-伊红(HE)染色观察支气管肺组织病理学改变;Masson染色观察小气道壁胶原沉积情况;图像分析系统测量并计算肺泡平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)以及小气道管壁厚度、平滑肌和胶原厚度;酶联免疫吸附试验法(ELISA)测量肺组织匀浆中TNF-α含量,免疫组化法染色测定支气管肺组织中p-ERK的表达。结果:(1)大鼠一般状况:对照组大鼠精神好,活动好、反应灵敏、毛发洁白润泽,进食好,无咳嗽,呼吸平稳。模型组大鼠精神萎靡、活动差、反应迟钝、毛发枯黄无光泽,进食减少,后期咳嗽明显且呼吸急促。干预组大鼠精神可,活动可、反应灵敏、毛发略发黄、有光泽,进食可,无明显咳嗽及呼吸急促,较模型组明显改善。(2)肺大体标本观察:对照组大鼠两肺体积正常,表面光滑,呈粉红色,无斑点。模型组大鼠两肺体积明显膨大,呈苍白、部分肺表面可见黑色斑点。干预组大鼠两肺体积略增大,表面光滑,呈淡粉红色,无斑点。(3)支气管肺组织病理观察:对照组大鼠结构正常。模型组大鼠气道黏膜上皮排列紊乱,纤毛上皮部分脱落,纤毛粘连倒伏,气道杯状细胞增生,支气管壁、平滑肌增厚明显,胶原蛋白沉积增加,管腔明显狭窄,小气道腔内分泌物多,气管及周围可见大量炎性细胞浸润,肺泡壁断裂、肺泡融合、肺泡腔不规则的扩大。干预组大鼠支气管肺组织病理改变较模型组明显改善。(4)BALF中细胞总数和分类:模型组细胞总数(6.48±0.25×10~8/L)、中性粒细胞比率(30.56±2.02%)分别较对照组细胞总数(1.82±0.11×10~8/L)、中性粒细胞比率(12.5±1.51%)显著升高(均P0.01)。干预组细胞总数(3.23±0.20×10~8/L)、中性粒细胞比率(24.8±2.66%)分别较模型组显著下降(均P0.01)。(5)肺泡结构定量分析:模型组MLI(95.69±8.93×10-6m)较对照组(47.59±4.33×10-6m)明显升高(P0.01),而MAN(90.31±9.49×10~6个/3，

本文编号：1421537