寒冷刺激支气管上皮细胞产生外泌体促肺成纤维细胞表达气道重塑相关因子

发布时间：2018-03-24 15:23

  本文选题：寒冷刺激　切入点：外泌体　出处：《中国生物化学与分子生物学报》2017年10期

【摘要】：外泌体可由多种细胞分泌,是具有多种生物学功能的细胞外囊泡,但其在气道重塑中的作用尚不明确。为探讨经寒冷刺激的人支气管上皮细胞(BEAS-2B)分泌的外泌体对人胚肺成纤维细胞(HLF1)气道重塑相关因子表达的影响,收集BEAS-2B细胞株培养液提取外泌体,利用透射电镜及Western印迹对外泌体进行其大小、形态及标志性蛋白的检测;提取的外泌体与HLF1共同培育,分别设置空白对照组、正常对照组(加入未作干预的BEAS-2B细胞所产的外泌体)及寒冷刺激组(加入经寒冷刺激后的BEAS-2B细胞所产的外泌体)。运用Real-time PCR及Western印迹技术,分别检测各组HLF1表达FGF-2、TNF-α、MMP-9的mRNA及蛋白情况。结果显示,提取BEAS-2B细胞分泌的外泌体为直径小于100 nm的圆形或椭圆形结构,并表达外泌体标志性蛋白CD9、TSG101、ALIX;寒冷刺激组24 h后,其FGF-2、TNF-α、MMP-9的mRNA及蛋白表达均显著高于空白对照组及正常对照组(均P0.05)。本研究结果表明,BEAS-2B细胞能够释放外泌体;经寒冷刺激后的BEAS-2B细胞所释放的外泌体可以携带并传递生物信号,诱导HLF1表达气道重塑相关因子。
[Abstract]:Exosomes secreted by many cells, has many biological effects of extracellular vesicles, but its role in airway remodeling is not clear. To investigate the cold stimulation of human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) exosomes secreted in human embryonic lung fibroblasts (HLF1) expression of gas channel remodeling related factors, collecting BEAS-2B cells culture fluid extract exosomes, its size by using transmission electron microscopy and Western blotting detection of urinary foreign body, and the shape of the protein marker; exosomes derived from HLF1 co cultivation, respectively set the blank control group, normal control group (exosomes produced without adding the intervention of BEAS-2B cells) and cold stimulation group (adding exosomes by cold stimulation of BEAS-2B cells produced by Real-time). PCR and Western blot, respectively to detect the HLF1 expression of FGF-2, TNF- alpha, mRNA and protein of MMP-9. The results showed that extraction of exosomes secreted by BEAS-2B cells were round or oval structure with diameter less than 100 nm, and the expression of exosome marker protein of CD9, TSG101, ALIX; cold stimulation group after 24 h, the FGF-2, TNF- alpha, mRNA and protein expression of MMP-9 was significantly higher than that of the control group and the normal the control group (P0.05). The results of this study show that BEAS-2B cells can release exosomes; exosomes by cold stimulation of BEAS-2B cells after release can carry biological signals, HLF1 expression induced by airway remodeling associated factors.

【作者单位】： 重庆医科大学附属第二医院呼吸内科;
【基金】：国家自然科学基金面上基金(No.81270102) 重庆市自然科学基金(No.cstc2012jj A10050) 重庆市教委科学技术研究(No.KJ120301)资助~~
【分类号】：R56

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 崔德健;加强对慢性阻塞性肺疾病气道重塑及其发生机制的研究[J];中华内科杂志;2004年09期

2 徐卫华,沈华浩;肺泡巨噬细胞合成转化生长因子β1在慢性阻塞性肺疾病气道重塑中的作用[J];中华结核和呼吸杂志;2005年01期

3 陈玉娟;;气道重塑的治疗研究进展[J];新医学;2008年03期

4 李丽丽;黄茂;;气道重塑评估技术的研究进展[J];中华哮喘杂志(电子版);2009年02期

5 管频;李伟;;慢性阻塞性肺疾病气道炎症与气道重塑研究进展[J];海南医学;2010年17期

6 李红;张沙沙;;气道重塑与慢性阻塞性肺疾病[J];中国现代药物应用;2011年20期

7 张莉莉;尚莉丽;;神经信号转导通路与气道重塑[J];临床肺科杂志;2012年11期

8 宋一平;生长因子在气道重塑中的作用[J];国外医学.呼吸系统分册;1999年01期

9 宋一平;崔德健;茅培英;梁延杰;彭瑞云;崔雪梅;王德文;;慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道重塑病理组织学表现和细胞外基质变化的研究[J];感染.炎症.修复;2000年01期

10 张晓岩;林江涛;;如何减轻和避免哮喘患者的气道重塑[J];中华哮喘杂志(电子版);2007年02期

相关会议论文 前10条

1 周亮;鲁继荣;马青山;成焕吉;汤钟玲;林亚琳;;药物对支气管哮喘气道重塑模型干预效果的研究[A];中华医学会第五次全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第一次大会论文汇编[C];2006年

2 许霞;韩秀迪;王洪超;肖伟;;慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺组织中尿激酶型纤溶酶原激活物系统成分与气道重塑关系的研究[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年

3 戴文鑫;罗百灵;王丽静;;胰岛素样生长因子Ⅰ在慢性阻塞性肺疾病大鼠小气道重塑中的作用研究[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年

4 朱艳芬;宋泽庆;;哮喘小鼠气道重塑中α平滑肌肌动蛋白的表达[A];中华医学会呼吸病学年会——2011（第十二次全国呼吸病学学术会议）论文汇编[C];2011年

5 王光辉;金发光;楚东岭;段丽;;支气管哮喘豚鼠气道重塑中的基质金属蛋白酶9及其抑制物的表达[A];中华医学会第五次全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第一次大会论文汇编[C];2006年

6 林洁;戴元荣;颜孙舜;吴斌;;成肌纤维细胞在气道重塑中的作用及地塞米松对其影响[A];华东地区第6届中青年呼吸医师论坛暨浙江省第29届呼吸疾病学术年会论文汇编[C];2007年

7 王传夏;李昌崇;罗运春;李孟荣;叶乐平;;肺泡巨噬细胞在哮喘大鼠气道重塑中的作用[A];2005年浙江省儿科学学术年会论文汇编[C];2005年

8 王苹莉;张根生;覃雪军;邱章伟;李娜;李雯;沈华浩;;早期多次卡介苗接种对哮喘小鼠气道重塑的影响[A];中华医学会第七届全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第三次大会论文汇编[C];2010年

9 欧阳海峰;倪殿涛;;肺表面活性物质在支气管哮喘大鼠气道重塑中的作用及机制[A];中华医学会第五次全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第一次大会论文汇编[C];2006年

10 张晓岩;林江涛;李香凝;杨萌;俞红霞;李桂琴;黄小杰;王萍;张岚;周童亮;舒峻;;纤溶酶原激活物抑制剂1基因多态性与支气管哮喘气道重塑关系的研究[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年

相关博士学位论文 前10条

1 王桂成;IL-20在支气管哮喘Th2免疫应答及气道重塑中作用的研究[D];山东大学;2015年

2 沈启英;七氟醚对哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响及机制探讨[D];安徽医科大学;2015年

3 蒋婧瑾;TLR3参与COPD气道重塑的发生及机制研究[D];浙江大学;2015年

4 王苹莉;早期多次卡介苗接种对哮喘小鼠气道重塑的影响及相关免疫机制研究[D];浙江大学;2010年

5 辛晓峰;支气管哮喘气道重塑的临床与实验研究[D];第二军医大学;2006年

6 李艳萍;小鼠气道重塑模型中NF-κB通路与角质细胞生长因子和转化生长因子相关作用研究[D];四川大学;2007年

7 董亮;转录因子T-bet/GATA-3调节哮喘气道炎症及气道重塑的机制研究[D];山东大学;2007年

8 侯长春;高迁移率族蛋白B1在调节支气管哮喘气道重塑中的作用及相关机制的研究[D];广西医科大学;2015年

9 张路;1，，25-二羟维生素D_3对哮喘小鼠气道重塑及气道上皮细胞凋亡的影响[D];北京协和医学院;2015年

10 郭治;IL-33参与支气管哮喘气道重塑的机制研究[D];山东大学;2014年

相关硕士学位论文 前10条

1 杜彩霞;核心蛋白聚糖对哮喘小鼠气道重塑的影响[D];青岛大学;2013年

2 孟祥珍;联合应用IL-4MT及sIL-5Rα对哮喘小鼠气道重塑及TGF-β1、Act-A的影响[D];第四军医大学;2015年

3 曹柳兆;FSTL1与支气管哮喘气道重塑的相关性研究[D];山东大学;2017年

4 程雪兵;促红细胞生成素对哮喘小鼠气道重塑模型的影响[D];延边大学;2017年

5 巩雪芳;支气管哮喘气道重塑中地塞米松对碱性成纤维细胞生长因子、神经生长因子表达的影响[D];山西医科大学;2010年

6 王尧;氧化应激与哮喘气道炎症、气道重塑的关系及药物干预的实验研究[D];南昌大学;2009年

7 缑剑;低剂量茶碱对丙烯醛诱导的大鼠气道重塑的干预作用[D];泸州医学院;2010年

8 李锋;基质金属蛋白酶-9/组织金属蛋白酶抑制剂-1在小鼠哮喘模型气道重塑中的动态表达[D];安徽医科大学;2005年

9 周少华;脂联素对慢性阻塞性肺疾病气道重塑的影响及机制研究[D];南昌大学;2014年

10 刘璇;多靶点酪氨酸激酶抑制剂对慢性哮喘小鼠气道重塑干预作用的研究[D];南京医科大学;2008年

本文编号：1658885