柴朴汤对支气管哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞凋亡及调控基因Fas，Fas

发布时间：2016-11-12 12:35

  本文关键词：柴朴汤对支气管哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞凋亡及调控基因Fas，Fas-L，Bcl-2表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

《南华大学》 2012年

柴朴汤对支气管哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞凋亡及调控基因Fas，Fas-L，Bcl-2表达的影响

张於  

【摘要】：目的：通过建立支气管哮喘豚鼠模型，观察中药柴朴汤对哮喘豚鼠支气管肺组织中嗜酸性粒细胞凋亡及调控基因Fas,Fas-L,Bcl-2表达的影响，探讨柴朴汤促进支气管哮喘嗜酸性粒细胞凋亡的可能机制。 方法：健康雄性英国短毛种豚鼠40只，按随机数字表法，将实验豚鼠随机分为4组，正常对照组，哮喘模型组，地塞米松组，柴朴汤组，每组10只。采用卵蛋白（OVA）致敏和反复激发复制豚鼠的哮喘模型。末次雾化吸入后，针对各组豚鼠的症状表现进行行为体征评分；检测各组豚鼠血液中嗜酸性粒细胞数及支气管肺泡灌洗液中白细胞数，嗜酸性粒细胞数，嗜酸性粒细胞比例；苏木素-伊红染色法观察各组豚鼠支气管肺组织病理改变；TUNEL法检测各组豚鼠支气管肺组织中嗜酸性粒细胞凋亡；免疫组化、Western Blot检测各组豚鼠支气管肺组织中Fas,Fas-L,Bcl-2蛋白表达；原位杂交、RT-PCR检测各组豚鼠支气管肺组织中Fas,Fas-L,Bcl-2mRNA表达。 结果： 1.各组豚鼠支气管哮喘症状评分与哮喘模型组比较，地塞米松组、柴朴汤组两组豚鼠哮喘症状明显改善，哮喘症状积分明显降低（P﹤0.05）。 2.各组豚鼠外周血中嗜酸性粒细胞计数与正常对照组比较，哮喘模型组外周血中嗜酸性粒细胞计数明显增高，差异显著（P＜0.01）；与哮喘模型组比较，，地塞米松组、柴朴汤组外周血中嗜酸粒细胞计数均明显降低（P＜0.05）；地塞米松组、柴朴汤组两组比较，无显著性差异（P＞0.05）。 3.各组豚鼠BALF中白细胞计数，嗜酸性粒细胞比例，嗜酸性粒细胞计数哮喘模型组BALF中白细胞数，嗜酸性粒细胞比例，嗜酸性粒细胞数，均高于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）；地塞米松组、柴朴汤组两组，BALF中白细胞数，嗜酸性粒细胞比例，嗜酸性粒细胞数均低于哮喘模型组（P＜0.05），但高于正常对照组（P＜0.05）。 4.各组豚鼠支气管肺组织病理改变正常对照组支气管肺组织结构正常完整，管腔光滑，气道黏膜无水肿，上皮细胞未见明显增生，偶见嗜酸粒细胞浸润，肺泡间隔完整正常。哮喘模型组支气管管腔狭窄变形，可见黏膜明显水肿，上皮细胞大量增生、脱落，黏液分泌明显增多，支气管平滑肌增生肥厚，支气管黏膜层与血管周围以嗜酸性粒细胞为主的大量炎性细胞浸润，肺泡间隔变厚，结构紊乱。地塞米松组、柴朴汤组两组支气管肺组织病理改变明显轻于哮喘模型组。 5. TUNEL法检测各组豚鼠支气管肺组织中EOS凋亡与正常对照组比较，哮喘模型组支气管肺组织中存在大量嗜酸性粒细胞浸润，嗜酸性粒细胞凋亡指数显著降低（P＜0.01）；与哮喘模型组比较，地塞米松组、柴朴汤组凋亡的嗜酸性粒细胞明显增加，凋亡指数显著增高（P＜0.01）；地塞米松组与柴朴汤组相比较，无明显统计学差异（P＞0.05）。 6.各组豚鼠支气管肺组织中Fas、Fas-L、Bcl-2蛋白表达免疫组化结果显示地塞米松组、柴朴汤组Fas、Fas-L蛋白表达均较哮喘模型组明显增加（P＜0.05）；与正常对照组比较，哮喘模型组豚鼠支气管肺组织Bcl-2蛋白阳性表达显著增加（P＜0.01），地塞米松组、柴朴汤组，均较模型组明显降低（P＜0.05）。Western Blot结果显示地塞米松组、柴朴汤组均较哮喘模型组支气管肺组织Fas、Fas-L蛋白表达显著增加（P＜0.01）；与正常对照组比较，哮喘模型组豚鼠支气管肺组织Bcl-2蛋白表达显著增加（P＜0.01），地塞米松组、柴朴汤组，均较模型组明显降低（P＜0.05）。地塞米松组与柴朴汤组相比较，无明显统计学差异（P＞0.05）。 7.各组豚鼠支气管肺组织中Fas、Fas-L、Bcl-2mRNA表达原位杂交结果显示与哮喘模型组比较，地塞米松组、柴朴汤组支气管肺组织中Fas、Fas-L mRNA阳性表达明显增加(P＜0.05)；哮喘模型组豚鼠支气管肺组织Bcl-2mRNA阳性表达较正常对照组显著增加（P＜0.01）；地塞米松组、柴朴汤组，均较模型组明显降低（P＜0.05）。RT-PCR结果显示：地塞米松组、柴朴汤组支气管肺组织中Fas、Fas-L mRNA表达较哮喘模型组显著增加（P＜0.01），较正常对照组亦明显增加（P＜0.05）；与正常对照组比较，哮喘模型组豚鼠支气管肺组织Bcl-2mRNA表达显著增加（P＜0.01）；地塞米松组、柴朴汤组，均较模型组明显降低（P＜0.05）。地塞米松组与柴朴汤组相比较，无明显统计学差异（P＞0.05）。 结论： 1.柴朴汤可以明显降低哮喘豚鼠外周血和支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数，减轻支气管肺组织的炎症反应。 2.柴朴汤可以促进哮喘豚鼠支气管肺组织中嗜酸性粒细胞凋亡 3.柴朴汤可以促进哮喘豚鼠支气管肺组织中Fas，Fas-L mRNA与蛋白表达，抑制Bcl-2mRNA与蛋白表达。

【关键词】：
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R562.25
【目录】：

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本文编号：171972