臭氧应激对气道粘膜细胞群落和粘蛋白表达谱的影响

发布时间：2016-11-15 14:13

本文关键词：臭氧应激对气道粘膜细胞群落和粘蛋白表达谱的影响，由笔耕文化传播整理发布。

《湖南师范大学》 2014年

臭氧应激对气道粘膜细胞群落和粘蛋白表达谱的影响

陈秋霞

【摘要】：目的：应用臭氧应激建立哮喘大鼠模型,观察臭氧应激不同时间大鼠气道粘膜细胞群落和粘蛋白表达谱的变化,并探讨二者之间的关系,以期进一步解释气道粘液高分泌机制,寻找气道高反应时粘液分泌紊乱的潜在干预靶点,为粘液高分泌性气道疾病的治疗提供一种新思路。方法：①SD大鼠20只,随机分为正常对照组与臭氧应激组,每组10只。分别检测两组大鼠的呼气相气道阻力(expiratory airway resistance, Re),支气管肺泡灌洗液中总蛋白含量测定及细胞计数和分类；测定血浆IgE含量；肺、支气管病理切片。②SD大鼠20只,随机分为5组：正常对照组；臭氧分别应激1、3、5、7天,各为一组,每组4只。分别取每组大鼠相同部位气管制作标本,采用扫描电镜方法观察与正常对照组相比较,臭氧应激不同时间动物气道上皮细胞群落的变化。③20只SD大鼠随机分为5组：正常对照组；臭氧分别应激1、3、5、7天,各为一组,每组4只。实时荧光定量PCR (RT-PCR)实验研究臭氧应激不同时间大鼠气道中粘蛋白Muc5ac、Muc5b mRNA表达量。制作切片,采用PAS染色结合免疫图像分析系统对粘液储备量进行测定。结果：①采用臭氧攻击支气管上皮细胞形成的变异性气道高反应性模型,各项指标(Re、BALF中细胞分类计数、血浆IgE含量、肺和支气管病理切片)的测定都证实了气道高反应性的存在；②正常大鼠气管上皮几乎全部被纤毛覆盖,少见或不可见杯状细胞与Clara细胞和基底细胞。损伤初期纤毛细胞脱落、数量减少,暴露出Clara细胞。随着臭氧持续应激损伤加重,纤毛细胞脱落加剧,Clara细胞数量减少,杯状细胞增多,未在纤毛细胞脱落处观察到杯状细胞。应激至第7天,杯状细胞数密度和比例增加至最多但增幅下降,纤毛细胞减至25%,少见Clara细胞。③RT-PCR:臭氧应激组大鼠气道内粘蛋白Muc5ac、Muc5b mRNA的表达均高于正常对照组,且与臭氧应激时间成正比。PAS：正常大鼠气道内有少量粘液。随着应激时间延长,粘蛋白染色加深、总量递增。结论：气道高反应模型鼠的呼吸道粘膜上皮细胞群落中杯状细胞的增多可能并非纤毛细胞转化导致,而是主要由Clara细胞充当干细胞向杯状细胞转化所致。粘蛋白基因表达谱的变化与细胞群落变化相关性强,前者可能应归因于细胞群落的变化。

【关键词】：
【学位授予单位】：湖南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R562.25
【目录】：

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