TRPC1在人气道上皮内的表达及其意义

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《重庆医科大学》 2015年

TRPC1在人气道上皮内的表达及其意义

何叶  

【摘要】：研究背景：瞬时受体电位蛋白-1(transient receptor potential canonical 1, TRPC1)是广泛存在于人体多种细胞膜及细胞器膜上一种压力敏感受体,参与人体内多种细胞的机电换能机制。气道高压力与肺功能减损、呼吸道炎症反应、气道黏液高分泌、气道重塑等肺脏多种病理生理改变有关,但其信号传导机制尚不清楚。因此,我们推测TRPC1蛋白可能是支气管上皮细胞内感知机械压力并介导相关病理改变的重要受体。目的：探讨人支气管上皮细胞内TRPC1蛋白的表达情况及其在气道感知机械压力机制中的作用。方法：1.收集人肺癌患者肺癌旁5cm以外的无病变组织,根据临床表现分为正常组、慢性阻塞性肺病组(COPD)和哮喘组,通过细胞免疫组织化学、Western-blot方法、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)证实TRPC1在人支气管上皮细胞中的表达情况,以及各组分布特点；2.16HBE细胞经TRPCl siRNA NC siRNA转染技术实现基因沉默后,通过细胞免疫荧光技术、Western-blot检测沉默效率；3.将16HBE细胞分组处理：单纯刺激组、刺激+TRPCl siRNA转染组、对照组,以细胞牵张刺激系统处理6 mmin后,激光共聚焦技术检测细胞内钙离子浓度变化。结果：1.COPD组、哮喘组支气管上皮细胞内TRPCl表达水平明显高于对照组(均P0.05)；2.经TRPCl siRNA转染后,16HBE细胞内TRPCl蛋白表达水平明显降低(均P0.01),经NC siRNA转染后,TRPCl蛋白的表达水平无明显变化(P=0.06,P=0.10)；3.单纯刺激组细胞内钙离子荧光强度显著高于对照组(对照组：0.08±0.007,单纯刺激组：0.18±0.008,P0.01),而刺激+TRPCl siRNA转染组钙离子荧光强度与对照组无明显差异(刺激+TRPCl siRNA组：0.09±0.007,P=0.06)。结论：1.TRPC1在支气管上皮细胞中广泛表达,且在COPD及哮喘患者肺组织中表达量较正常肺组织表达量明显升高；2.支气管上皮细胞16HBE经TRPCl siRNA转染后,细胞内TPRC1蛋白表达水平明显抑制；3.支气管上皮细胞内的TRPCl蛋白对机械压力刺激敏感。

【关键词】：
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R56
【目录】：

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