卡介苗对哮喘小鼠转录因子T-bet与GATA-3表达的影响

发布时间：2020-04-30 02:54

【摘要】： 背景:支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎性细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。研究证实,支气管哮喘的发病与Th1/Th2失衡有着密切关系,Th2细胞活化亢进是哮喘发病的重要机理。目前对哮喘防治重点已由单纯抗呼吸道痉挛转向抗炎治疗,尤其如何促进Th0型细胞向Th1转化,抑制Th2细胞从而控制哮喘发展。现有资料发现多种转录因子或细胞内信号途径与Th细胞分化有关。其中转录因子GATA-3和T-bet在其中发挥着重要作用。有人认为T-bet与GATA-3的平衡决定了T细胞在黏膜免疫的命运,决定了Th1/Th2平衡的稳定性。卡介苗(BCG)作为非特异性免疫反应调节剂,能抑制Th2型免疫反应而上调Th1型免疫反应,减轻气道炎症反应。但卡介苗是否调节转录因子T-bet与GATA-3的平衡来减轻气道炎症尚未见报道。 目的:通过建立小鼠哮喘模型,给小鼠分别进行预防和治疗性接种BCG,观察BCG对哮喘小鼠T淋巴细胞转录因子T-bet蛋白与GATA-3蛋白表达的影响并比较预防和治疗性接种的差异,探讨其可能的机制。 方法:32只雄性昆明小鼠随机分成正常对照组(A组),哮喘模型组(B组),BCG预防组(C组),BCG治疗组(D组)。通过卵清蛋白致敏建立哮喘模型。观察4组小鼠的一般情况;肺泡灌洗液的细胞分类;肺组织的病理切片;用免疫组化半定量分析法检测肺组织中T-bet和GATA-3蛋白的表达。 结果: 1.BALF检查显示: 哮喘组(B组)与对照组(A组)比较,BALF中白细胞总数及嗜酸性粒细胞比例均明显升高(P＜0.01)。BCG接种各组与哮喘组(B组)比较均能明显降低BALF中白细胞总数及嗜酸性粒细胞比例(P＜0.01),接种两组之间无显著差异(P＞0.05)。 2.病理检查显示: 病理学HE染色发现:对照组(A组)小鼠肺内几乎无炎性细胞浸润;而哮喘组(B组)小鼠肺内可见大量炎性细胞和浸润,其炎性细胞浸润程度与对照组(A组)比较明显增加(P＜0.01)。BCG接种后,炎性细胞浸润程度较哮喘组(B组)明显降低(P＜0.01),但仍然比对照组(A组)严重(P＜0.01)。 3.免疫组化结果显示: 哮喘组(B组),卡介苗预防组(C组),卡介苗治疗组(D组)的T-bet表达量显著低于对照组(A组),其差异均有统计学意义(P均＜0.01);卡介苗预防组(C组),卡介苗治疗组(D组)的T-bet表达量与哮喘组(B组)比较明显增多,差异均有统计学意义(P均＜0.01)。卡介苗接种两组之间的比较差异无统计学意义(P＞0.05)。哮喘组(B组),卡介苗预防组(C组),卡介苗治疗组(D组)的GATA-3表达量显著高于对照组(A组),其差异均有统计学意义(P均＜0.01);卡介苗预防组(C组),卡介苗治疗组(D组)的GATA-3表达量与哮喘组(B组)比较明显减少,差异均有统计学意义(P均＜0.01);卡介苗接种两组之间的比较差异无统计学意义(P＞0.05)。 4.相关分析显示 哮喘组(B组)小鼠转录因子T-bet蛋白表达量与气道炎症呈显著负相关(r=-0.954 P＜0.01),与肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数百分比呈显著负相关(r=-0.900 P＜0.01);哮喘组(B组)小鼠转录因子GATA-3蛋白表达量与气道炎症呈显著正相关(r=0.954 P＜0.01),与肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数百分呈显著正相关(r=0.811 P＜0.05);哮喘组(B组)小鼠转录因子T-bet蛋白表达量与转录因子GATA-3蛋白表达量呈显著负相关(r=-0.981,P＜0.01)。 结论:1.通过OVA致敏激发成功的造成了哮喘的小鼠模型,在支气管哮喘模型中,转录因子T-bet和GATA-3失衡表达,表现为T-bet低表达,GATA-3高表达,T-bet表达量与GATA-3表达量呈负相关。T-bet和GATA-3蛋白表达量分别与气道炎症呈直线相关,T-bet和GATA-3的失衡表达很可能是哮喘气道炎症形成的重要原因之一。2.BCG不仅能够增加转录因子T-bet蛋白的表达,同时能够抑制转录因子GATA-3蛋白的表达。因此BCG可能通过纠正T-bet和GATA-3失衡表达来增加Th1细胞的分化,抑制Th2细胞的过度分化,调节Th1/Th2失衡,从而可以减轻哮喘的气道炎症反应。
【图文】：

对照组哮喘组预防组治疗组图3四组小鼠炎症细胞浸润评分比较组(A组)比较P<0.01，#与哮喘组(B组)比较P<0.01，△与卡介苗治疗组5。鼠转录因子卜bet蛋白表达量的变化(见表3，图4，，附组(A组)，J、鼠肺组织切片T一bet免疫组化中可见棕黄色至棕褐色主要位于气道上皮细胞和气道周围及肺组织中淋巴细胞等细胞喘组(B组)小鼠肺组织切片T一bet免疫组化阳性细胞数量稀少，少见浓染现象，表达范围较对照组减小，其表达量与对照组(A组S2.0肚0.14，P<0.01)，差异有统计学意义。G预防组(C组)、BCG治疗组归组)小鼠肺组织切片T一bet免疫
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R562.25

【参考文献】

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本文编号：2645310