从T细胞受体δ链多态性及T细胞凋亡的改变探讨支气管哮喘的慢性气道炎症机制

发布时间：2020-05-10 17:11

【摘要】：目的： γδT细胞与支气管哮喘的慢性气道炎症的发生和发展密切相关，本研究旨在通过检测支气管哮喘患者外周血及气道内γδT细胞百分率，Vδ_1～Vδ_3亚群的表达和多态性，探讨γδT细胞在哮喘气道慢性炎症产生或延续机制中的作用，以期为支气管哮喘的新免疫疗法提供理论指导和实验依据。 方法： 我们选择间歇发作或轻～中度非急性发作期哮喘患者7例，年龄、性别相匹配的对照8例，其中2例偶尔痰带血丝但多项检查未见胸腔内病变，4例为早期的周围型肺癌患者，，1例因左主支气管陈旧性内膜结核导致瘢痕狭窄，1例因食道反流导致慢性咳嗽。全部纳入的研究对象留清晨空腹外周血8ml，同时行纤维支气管镜检及支气管肺泡灌洗，计数灌洗液中细胞总数及分类计数。 实验方法为：(1)采用免疫荧光染色和流式细胞分析技术检测外周血及灌洗液中CD_4~+、CD_8~+T细胞和γδT细胞的百分率；(2)用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)法分析研究对象的外周血及灌洗液中T细胞受体Vδ基因(Vδ_1～Vδ_3)亚族的表达，并通过基因扫描分析确定各Vδ亚族的相对取用频率及T淋巴细胞的克隆状态；(3)对单克隆表达的Vδ基因，进一步行CDR_3区片段的亚克隆及测序。 结果： 1)哮喘患者在纤维支气管镜直视下均可见气道粘膜炎症改变，支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞分类计数显示淋巴细胞及嗜酸细胞比例较对照明显增加。两组外周血及灌洗液中CD_4~+和CD_8~+T细胞亚群分布无显著差异。哮喘患者灌洗液中γδT细胞比例(7.8±4.7％)较对照组(3.1±2.5％)显著增加(p＜0.05)。
【图文】：

图4.流式细胞分析检测外周血和BALYF6TC+RT细胞比例Fig4.Pereenatgeof泌TeellsinPeriPhearlbloodnadBALFasmeasuerdbyfioweytometyr左列:哮喘患者外周血(上图)及BALF(下图)检测图右列:对照者外周血(上图)及BALF(下图)检测图

)l哮喘组与对照组的T淋巴细胞在未予PHA一P刺激时，体外培养24小时后，细胞表面Fas的表达无显著差异，而予PHA一P刺激后哮喘组Fas的表达明显低于对照(见表4、图4a、4b)。表4.外周血T淋巴细胞Fas表达情况几b4.ExPressio从ofFasereePtoronhtePeriPheralbloodTI加nrPhoyctes研究对象未刺激病例组对照组刺激病例组对照组F+as细胞比例(%)44.8士20.750.8士16.767.8公4.3.88.2士10.3*与对照组相比p<.005图4a.T细胞Fas表达情况Fig4a.ExprssionofFasreeeptoronTeells
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2000
【分类号】：R562.25

【参考文献】

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1 李伟杰;T细胞受体及其与支气管哮喘[J];国外医学.呼吸系统分册;1999年02期

2 彭黎明;六种细胞凋亡检测方法的比较[J];中华病理学杂志;1999年01期

3 薛建敏,徐永健,张珍祥,沈关心,熊盛道;哮喘患者外周血T淋巴细胞凋亡及其分子机制[J];中华结核和呼吸杂志;1999年09期

4 彭黎明;细胞凋亡检测的研究进展[J];中华医学检验杂志;1996年06期

本文编号：2657626