白介素10对哮喘小鼠子宫珠蛋白相关蛋白1和白介素5的影响

发布时间：2020-05-11 14:13

【摘要】：目的：通过观察腹腔注射白介素10(IL-10)对哮喘小鼠肺组织中子宫珠蛋白相关蛋白1(UGRP1)和肺泡灌洗液(BALF)中白介素5(IL-5)表达的影响,探讨IL-10、UGRP1及IL-5在哮喘发病中的作用机制及其相互关系。方法：将40只Balb/c雌性小鼠,随机分为哮喘模型组(X)(n=8只)、IL-10干预组(B1,B2,B3)(n=24只)、空白对照组(K)(n=8只)。哮喘模型组：每只小鼠于第1天和第8天腹腔注射0.2ml抗原混悬液(鸡卵清蛋白OVA100ug+氢氧化铝2mg+生理盐水0.2ml)致敏,第14天开始激发,经0.75%戊巴比妥麻醉后,采用鼻腔滴入法,每只小鼠滴入40u12%OVA溶液(即2gOVA+100ml生理盐水)连续7天。IL-10干预组(B 1,B2,B3)：致敏同哮喘模型组,在激发前30分钟腹腔注射0.125%IL-10溶液(10ugIL-10+400ml生理盐水)。注射量依次为：B1组：0.02ml(含IL-1025ng)；B2组：0.06ml(含75ng IL-10)；B3组：0.6ml(含750ng IL-10)。空白对照组：第1天和第8天腹腔注射0.2ml生理盐水,第14天开始在0.75%戊巴比妥麻醉后用40ul生理盐水滴鼻,连续7天。于末次激发24小时后处死小鼠。采用HE染色评估小鼠肺组织的一般形态和气道炎性细胞浸润情况,用免疫组织化学检测小鼠肺组织中UGRP1的表达,行实时荧光定量PCR法检测小鼠肺组织中UGRP1和内参基因(GAPDH)的mRNA含量,并用酶联免疫夹心法(ELISA)检测肺泡灌洗液中UGRP1和IL-5的含量。各组数据均用x士s表示,不同组间行单因素方差分析,肺泡灌洗液中UGRP1和IL-5相关性用直线相关分析,用SPSS13软件系统统计处理数据,p0.05表明存在显著差异。结果：(1)肺组织病理组织学HE染色：K组小气管黏膜无明显水肿,管腔光滑、无闭塞,小气道及小血管周围未见炎性细胞浸润。X组可见小气道及小血管周围有大量的炎性细胞浸润,粘膜及粘膜下层水肿,肺泡腔可见嗜酸性粒细胞、单核细胞及溢出的红细胞等。B1、B2及B3组肺泡结构清晰,肺泡腔内及肺泡间质炎性细胞和渗出物减少,支气管粘膜上皮基本完整,可见有明显的炎症吸收,且B1组炎症吸收较差,B3组较明显。(2)免疫组织化学检测肺组织UGRP1表达：K组肺组织气道上皮UGRP1表达呈强阳性,X组UGRP1表达呈阴性,B1、B2及B3组UGRP1表达呈阳性,其中B 1组较弱,B3组较强；(3)肺组织UGRP1mRNA的表达：肺组织UGRP1mRNA在K组中的表达最高,在X组中的表达显著降低,而B 1、B2及B3组中的表达则介于前两组之间,且随着IL-10剂量的增加,UGRP1的表达也增加。各组之间进行两两比较,存在显著差异(P0.05)。(4)肺泡灌洗液中UGRP1及IL-5的含量：1)UGRP1含量：K组BALF由UGRP1含量最高,X组UGRP1含量最低,而B1、B2及B3组UGRP1含量介于前两组之间,且其含量随着IL-10增加而增加。X组BALF中UGRP1含量明显低于B 1、B2、B3组及K组,差异有统计学意义(P0.05)；B1组UGRP1含量明显低于B2,B3、K组,差异有统计学意义(P0.05),其余组间UGRP1差异不明显(P0.05)。2)IL-5的含量：K组BALF中IL-5含量最低,X组IL-5含量最高,B1、B2、B3组IL-5含量介于两者之间,且其含量随着IL-10增加而减少。X组IL-5含量明显高于K组和B1、B2、B3组(P0.05)；B1、B2、B3、K组之间进行比较,IL-5含量无明显差异(P0.05)。结论：(1)哮喘组小鼠肺组织及肺泡灌洗液UGRP1表达显著降低,而肺泡灌洗液IL-5含量明显增加。(2)IL-10能增加哮喘小鼠BALF中UGRP1的含量,诱导小鼠肺组织UGRP1及其mRNA的表达,降低肺泡灌洗液中IL-5的含量水平,从而达到抑制肺部炎症反应。
【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R562.25

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