bFGF在低氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及机制

发布时间：2020-05-12 04:33

【摘要】：目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是否参与低氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖及其与周期蛋白D1(CyclinD1)的关系。方法:取健康SPF级雄性大鼠,体外分离培养大鼠PASMCs,并传至3代,分别采用低氧、常氧培养大鼠PASMCs,观察不同培养条件下PASMCs生长情况。低氧组分为10%,5%,2%,1%氧浓度,分别培养PASMCs 24h,48h,72h,观察细胞生长情况,采用MTT法检测不同氧浓度时PASMCs增殖,选取增殖最活跃的氧浓度作为后续实验中低氧组的氧浓度。采用随机数法将细胞分为4组:1、常氧组,2、低氧组,3、低氧+NC siRNA组,4、低氧+bFGF siRNA组,5、低氧+CyclinD1 siRNA组,分别培养大鼠PASMCs 24h,48h,72h,采用RT-PCR、Western-blot分别检测不同培养条件下bFGF、CyclinD1 RNA及蛋白的表达情况。结果:1、体外成功培养的大鼠PASMCs经形态学及α-actin免疫细胞化学染色法证实。2、低氧促进大鼠PASMCs增殖,通过描绘生长曲线及MTT法发现PASMCs在1%氧浓度时增殖最为活跃。3、与常氧组相比,低氧组bFGF及CyclinD1 mRNA及蛋白表达均升高。4、bFGF mRNA及蛋白在转染bFGF siRNA后表达量均明显下降,而转染CyclinD1 siRNA后表达量无明显差异,CyclinD1 mRNA及蛋白在转染bFGF siRNA及CyclinD1 siRNA后表达量均明显下降。结论:1、低氧促进大鼠PASMCs增殖,且bFGF参与低氧诱导大鼠PASMCs增殖。2、bFGF通过CyclinD1途径参与低氧诱导大鼠PASMCs增殖。
【图文】：

图 1、原代大鼠 PASMCs 的体外培养（×100、×400）Fig 1：Primary cultured rat pulmonary artery smooth muscle cells.

图 2、免疫细胞化学染色，细胞核染成亮蓝Fig 2：PASMCs Smooth muscle actin (SMA) iht blue and the cytoplasm is dyed brown.3.2 不同氧浓度培养大鼠 PASMCs，，第 1 天不
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R563.9

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本文编号：2659661