白细胞介素32在博来霉素诱导的小鼠肺纤维化组织中的表达及意义

发布时间：2020-05-12 07:38

【摘要】： 目的：观察白细胞介素32(Interleukin-32, IL-32)在博来霉素(bleomycin, BLM)诱导的小鼠肺纤维化过程中各期的表达和糖皮质激素治疗后其表达的变化,探讨IL-32在肺纤维化发病机制中的作用及意义。 方法：将72只体重为20-22g的雄性小鼠随机分为对照组、实验组和治疗组,每组24只。对照组给予0.9%氯化钠注射液0.04ml,实验组和治疗组给予0.04ml的BLM(5mg/kg)一次性气管内灌注用以复制肺纤维化模型,治疗组在BLM灌注后每天给予地塞米松(dexamethasone, DM)5mg/kg腹腔注射。然后各组分别于第3、7、14和28天各处死6只小鼠,取肺组织,做病理切片、免疫组织化学染色,应用Western Blot法测定IL-32表达。 结果：对照组的小鼠肺组织病理学检查改变轻微,炎性细胞浸润少,肺泡炎性渗出少见,肺泡间隔无增厚,无成纤维细胞的增殖,没有明显的肺纤维化性改变。实验组肺组织病理切片按时间顺序呈现由肺泡炎至纤维化动态改变,早期肺泡炎性渗出较重,肺泡间隔有大量的炎性细胞浸润。中晚期可见炎性渗出逐渐减轻,肺泡萎陷、消失,大小不等,肺泡间隔逐渐增厚,成纤维细胞大量增殖；实验组的肺泡炎和肺纤维化评分均高于对照组和治疗组,有统计学意义(P0.05)；治疗组病理学检查也按时间顺序呈现由肺泡炎到肺纤维化的动态改变,但肺泡炎和肺纤维化的程度较实验组轻。免疫组织化学检测显示IL-32在对照组仅有少量的表达,主要在肺泡壁上表达,实验组显示IL-32的表达在第7、14天明显增高,第28天明显降低,主要在肺泡壁上皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和肺泡腔的渗出液中表达,治疗组的表达相对较轻,但仍高于对照组。应用Western Blot法测定IL-32蛋白的表达显示,对照组仅有少量的表达,各个时间点没有明显的差异(P0.05),实验组中IL-32蛋白表达从第3天开始高于对照组和治疗组,第14天达到高峰,第28天降低,但仍较对照组和治疗组高(P0.01)。组内各个时间点除了第3天与第28天相比没有统计学差异外(P0.05),其余均有统计学意义(P0.05)；治疗组也呈现类似的趋势,但比实验组的表达明显减轻,有显著的统计学意义(P0.01)。 结论：IL-32在肺纤维化形成过程中存在高表达,可能在肺纤维化形成的早中期发挥重要作用；地塞米松对肺纤维化的早期具有一定的治疗作用。
【图文】：

天更加明显，部分肺泡萎陷消失。IL一犯主要在肺泡上皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、细支气管上皮细胞中表达，阳性细胞呈棕褐色颗粒状，成纤维细胞l一扫表达lL一32较弱;治疗组(图2.F一I)也呈现类似的变化顺序，与实验组相比，染色明显减轻，且肺泡炎和纤维化的程度较实验组轻。

江苏大学硕士学位论文实验组、治疗组和对照组的 westernblofting法检测IL一32蛋白的表达(图3、4和表6)治疗组对照组实验组IL一32旦一aetin图3肺纤维化过程中各组小鼠肺组织中IL一32蛋白印迹 Fig.3TheexPressionsofIL一 2ProteinineaehgrouPbyWesternBlotting注:p一actin为内参组别表 6IL一2蛋白表达情况比较(x士s，n=6):Tab· 6TheeomParisonofIL一32ProteinexPressions第3天第7天第14天第28天治疗组6 0.232士 o.o22ab0.363士0.021”b 0.571士0.021”b 0.303士0.0科”b实验组60667士 o.ol7ab0.591士0.022“b 0.977士0.013“bO，678士0.012”b对照组6 0.162士 0.0210.163士0.020 0.169士0.030 0.160士0.023注:实验组与同一天对照组和治疗组比较，“P<0.01;除实验组第3天与第28天IL一32表达相比外0.05，同组不同天IL一32表达之间两两相比，，bP<0.ol。
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R563

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本文编号：2659883