不同药物对香烟诱导的巨噬细胞氧化应激相关因子表达的影响

发布时间：2020-05-30 21:49

【摘要】： 目的 (1)研究地塞米松、氨茶碱、盐酸氨溴索和红霉素对经香烟预处理的大鼠肺泡巨噬细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)、转化生长因子(TGF)-β1和c-fos mRNA及其蛋白表达的影响,探讨这几种药物在慢性阻塞性肺疾病抗氧化治疗中的作用机制。 (2)研究TGF-β1对经香烟预处理的大鼠肺泡巨噬细胞γ-GCS和c-fos mRNA及其蛋白表达的影响,探讨TGF-β1在慢性阻塞性肺疾病氧化/抗氧化失衡中的作用机制。 方法 (1)通过支气管肺泡灌洗(BAL)获取大鼠肺泡巨噬细胞,随机分为6组:对照组、香烟组、地塞米松组、氨茶碱组、沐舒坦组和红霉素组。后4组分别加入地塞米松、氨茶碱、盐酸氨溴索(沐舒坦)和红霉素,使其终浓度分别为2.5μg/ml、20μg/ml、11μmol/ml和5μg/ml。2小时后除对照组外,每组均加入香烟烟雾提取物(CSE),对照组加入磷酸盐缓冲液(PBS)。于24、48和12小时收取细胞爬片,采用免疫细胞化学方法分别检测肺泡巨噬细胞中γ-GCS-HS、TGF-β1及c-fos蛋白表达水平。于18、36和6小时收取细胞爬片,采用原位杂交方法分别检测肺泡巨噬细胞中γ-GCS-HS、TGF-β1及c-fos mRNA表达水平。 (2) BAL获取大鼠肺泡巨噬细胞,随机分为3组:对照组、香烟组和TGF-β1组。TGF-β1组加入终浓度为3ng/ml的TGF-β1 ,2小时后除对照组外,余两组均加入CSE,对照组加入PBS。于20、10小时收取细胞爬片,采取免疫细胞化学方法分别检测肺泡巨噬细胞中γ-GCS-HS及c-fos蛋白的表达。于10、5小时提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分别检测肺泡巨噬细胞中γ-GCS-HS及c-fos mRNA的表达。 结果 (1)香烟对γ-GCS、TGF-β1和c-fos mRNA及其蛋白表达的影响:与对照组(0.206±0.006,0.163±0.019;0.219±0.015,0.190±0.002;0.518±0.031,0.341±0.054)比较,香烟组γ-GCS(0.493±0.090,0.468±0.065)、TGF-β1(0.412±0.017,0.280±0.018)和c-fos(1.369±0.150,1.121±0.124)mRNA及其蛋白的表达水平明显增高,差别有统计学意义,P均0.01。 (2)地塞米松对γ-GCS、TGF-β1和c-fos mRNA及其蛋白表达的影响:与香烟组(0.493±0.090,0.468±0.065;0.412±0.017,0.280±0.018;1.369±0.150,1.121±0.124)比较,地塞米松组γ-GCS(0.370±0.818,0.314±0.085)、TGF-β1(0.363±0.060,0.212±0.009)和c-fos(0.983±0.081,0.595±0.399)mRNA及其蛋白的表达水平明显降低,差别有统计学意义,P均0.01。
【图文】：

香烟组与药物组GCSmRNA及其蛋白的表达

香烟组与药物组TGFmRNA及其蛋白的表达
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R563.9

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本文编号：2688775