BAG-1—GR信号通路调控糖皮质激素抗炎效应的研究
发布时间:2020-06-01 10:29
【摘要】:1. 背景与目的: 急性肺损伤(acute lung injury, ALI)/急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)是临床上常见的急性低氧血症性呼吸衰竭,其发病机制是创伤、休克、感染等引起的全身炎症反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome, SIRS)在肺部的表现,并最终发展为终末呼吸单位弥漫性损伤并发渗出性肺水肿。ARDS是临床病死率极高的危重症,其病死率约50%。研究发现,ALI/ARDS的发生与过度的全身炎症反应(SIRS)有关。如果能够在SIRS这一环节进行及时、正确的调控全身性炎症反应,就可以在很大程度上降低ALI/ARDS的病死率。 糖皮质激素(glucocorticoid, GC)是治疗ARDS应用较普遍的药物,其中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor, GR)是GC效应发挥的关键环节。尽管GC对肺脏的保护效应是肯定的,但目前临床上应用GC救治ARDS病人的远期治疗效果不甚理想,据多中心临床研究发现,GC不能降低ARDS的发生率和病死率,大剂量GC应用的后果可能是感染扩散所导致的病死率增加。近年来研究表明,ARDS病人存在着GC抵抗,这种GC抵抗机制不明确,可能与GR表达下调或GR功能受到抑制有关。所以,本课题以脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)致SIRS-肺损伤组大鼠以及地塞米松(Dexamethasone, Dex)治疗组大鼠为研究对象,对GR的表达和活性调控机制进行深入研究,旨在阐明外源性GC治疗SIRS-肺损伤大鼠的同时,BAG-1-GR信号通路被激活。该信号通路负向调节GR抗炎活性,是导致外源GC抵抗(glucocorticoid receptor resistance)的重要原因。 2. 研究方法与内容 本实验运用蛋白免疫印迹、凝胶迁移率电泳、逆转录PCR、免疫细胞化学染色、GRE 体外转录激活分析等技术,分以下3 个部分进行了探讨:1)首先对LPS 致SIRS-肺损伤组大鼠血清皮质醇、肺组织细胞GR 表达和DNA 结合力的变化特点进行分析;研究LPS+Dex、LPS+Dex+Dex 治疗组大鼠肺组织细胞糖皮质激素受体DNA 结合力的变化,阐明LPS 致SIRS-肺损伤组大鼠存在着内源性和外源性的GC 抵抗及其可能机制;2)通过研究LPS+Dex 治疗组大鼠肺组织细胞中GR 辅伴侣蛋白Bcl-2 相关抗凋亡蛋白-1 (Bcl-2-associated athanogene 1, BAG-1)表达变化及其与GR 的相互作用关
【图文】:
00000h 1h 2h 4h 8h 12h * P<0.01 vs. Control图 1-1 SIRS-肺损伤大鼠血清皮质醇浓度变化肺损伤组大鼠肺组织 GR mRNA 表达一过性降低-PCR 结果显示:GR mRNA 表达在 LPS 致伤后 2h 明显平,12h 开始恢复,24h 基本恢复至正常水平,,见图 1-2M N 1 2 3 4 5 6
N:Normal control;1、2、3、4、5、6:LPS/1、2、4、8、12、24h图 1-3 SIRS-肺损伤大鼠肺组织 GR 蛋白表达表 1-2 LPS 致伤组大鼠肺组织 GR mRNA 和蛋白表达变化(n=5, x ±s)组别 GR mRNA GR protein常对照组 4.02±0.09 3.75±0.25PS 致伤组1 h 3.97±0.12 3.59±0.202 h 1.56±0.11* 3.52±0.094 h 1.48±0.09* 1.25±0.15*8 h 1.65±0.15* 1.08±0.08*12 h 3.20±0.16#1.21±0.16*24 h 4.15±0.19 1.15±0.12*
【学位授予单位】:第三军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R563.8
本文编号:2691348
【图文】:
00000h 1h 2h 4h 8h 12h * P<0.01 vs. Control图 1-1 SIRS-肺损伤大鼠血清皮质醇浓度变化肺损伤组大鼠肺组织 GR mRNA 表达一过性降低-PCR 结果显示:GR mRNA 表达在 LPS 致伤后 2h 明显平,12h 开始恢复,24h 基本恢复至正常水平,,见图 1-2M N 1 2 3 4 5 6
N:Normal control;1、2、3、4、5、6:LPS/1、2、4、8、12、24h图 1-3 SIRS-肺损伤大鼠肺组织 GR 蛋白表达表 1-2 LPS 致伤组大鼠肺组织 GR mRNA 和蛋白表达变化(n=5, x ±s)组别 GR mRNA GR protein常对照组 4.02±0.09 3.75±0.25PS 致伤组1 h 3.97±0.12 3.59±0.202 h 1.56±0.11* 3.52±0.094 h 1.48±0.09* 1.25±0.15*8 h 1.65±0.15* 1.08±0.08*12 h 3.20±0.16#1.21±0.16*24 h 4.15±0.19 1.15±0.12*
【学位授予单位】:第三军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R563.8
【参考文献】
相关期刊论文 前9条
1 马钧,景炳文,杨兴易,陈学云,严鸣,赵良;合理使用糖皮质激素在救治ARDS中的意义[J];第二军医大学学报;2003年05期
2 钱桂生;急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征研究现状与展望[J];解放军医学杂志;2003年02期
3 郭振辉,洪新,毛宝龄,钱桂生,邹霞英;核因子-κΒ活化在急性肺损伤发病中的作用[J];中华急诊医学杂志;2003年09期
4 孙荭,程云华,何贤辉,黄柏炎,徐丽慧,曾耀英;应激及地塞米松对小鼠胸腺细胞和脾脏细胞凋亡的作用[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2001年03期
5 傅传刚,仲剑平,张亚霏,徐仁宝;Trilostane和地塞米松对内毒素血症大鼠血清氨基酸和肿瘤坏死因子的影响[J];生理学报;1993年04期
6 苏踊跃,齐洁,罗向东;RNA干扰技术在功能基因研究中的应用[J];生命的化学;2002年05期
7 张德明,李永旺,毛宝龄,钱桂生;Toll样受体4与大鼠肺泡巨噬细胞内毒素耐受性的实验研究[J];中华结核和呼吸杂志;2003年07期
8 毛宝龄;深入探讨全身炎症反应的失控与调控[J];中华内科杂志;1997年01期
9 宋志芳,郭晓红,王树云,谢伟,殷娜,张悦,单慧敏,李文华;糖皮质激素在急性呼吸窘迫综合征综合救治中的价值探讨[J];中国危重病急救医学;2003年06期
本文编号:2691348
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/huxijib/2691348.html
最近更新
教材专著