STAT6反义寡核苷酸对哮喘小鼠脾淋巴细胞影响作用的研究

发布时间：2020-06-01 18:26

【摘要】：目的:研究STAT6 反义寡核苷酸对哮喘小鼠脾淋巴细胞的影响作用。 方法:实验细胞分组:正常鼠空白组(A 组)、正常鼠OVA 组(B 组)、哮喘空白组(C 组)、哮喘OVA 组(D 组)、哮喘治疗组(E 组)。正常设计并人工合成一段互补于小鼠STAT6 mRNA 翻译起始区271～290 的反义寡核苷酸片段,全链硫代修饰。用卵白蛋白和氢氧化铝复制哮喘模型,用淋巴细胞分离液分离脾淋巴细胞,进行体外培养并导入由阳离子脂质体转染剂Geneshuttle 携带的反义寡核苷酸,分别用RT-PCR 及免疫细胞化学观察脾淋巴细胞中STAT6 mRAN 的转录及STAT6 蛋白的表达水平,同时采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定脾细胞培养上清液中IL-4 的浓度。 结果:D 组脾淋巴细胞中STAT6 mRNA 表达水平(2.26±0.52)明显高于A 组(1.16±0.48)、B 组(1.34±0.36) 、C 组(1.20±0.24)、E 组(1.17±0.43),均具有显著性差异(P 均0.01),STAT6 ASODN 转染后,E 组脾淋巴细胞中STAT6 mRNA 表达水平显著低于D 组(P 0.01);免疫细胞化学结果显示导入反义寡核苷酸后,E 组STAT6 蛋白的表达明显减少;D 组脾淋巴细胞培养上清中IL-4 分泌水平(43.68±5.5 pg/ml)明显高于A 组(24.1±7.7 pg/ml)、B 组(29.63±8.9 pg/ml) 、C 组(28.49±6.3 pg/ml)、E组(26.47±8.4 pg/ml),均具有显著性差异(P 均0.01),STAT6 ASODN 转染后, E 组培养上清中IL-4 分泌水平显著低于D 组(P0.01)。 结论:STAT6 ASODN 可特异性抑制哮喘鼠脾淋巴细胞中STAT6 mRNA 的转录及STAT6 蛋白的表达,并且能特异性抑制脾淋巴细胞中IL-4 的分泌,为反义技术治疗哮喘提供了依据。
【图文】：

各组细胞RT-PCR电泳图谱

正常小鼠（HE×400）
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R562.25

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 赵鹰;弓清梅;田新瑞;任文霞;李建强;刘卓拉;;STAT6 ASODN对哮喘小鼠脾淋巴细胞影响的实验研究[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2006年02期

2 邓俊;周雨;;寡核苷酸靶向阻断STAT6治疗哮喘的研究进展[J];西南军医;2011年02期

3 刘丽;于秀华;成焕吉;;转录因子GATA-3和T-bet与支气管哮喘的关系[J];中国妇幼保健;2009年07期

4 王文志,罗凤鸣;反义寡核苷酸在治疗哮喘中的应用前景[J];国外医学.内科学分册;2003年04期

5 李海燕,郭琦;白细胞介素-5相关的支气管哮喘治疗策略基础研究[J];医学综述;2004年10期

6 姜春华;砒对于支气管哮喘之特殊疗效[J];上海中医药杂志;1956年02期

7 朱散之;;支气管哮喘治疗过程中的嗜酸性白细胞总数[J];国外医学.内科学分册;1976年05期

8 蒋天佑;;中医药治疗支气管哮喘50例临床观察[J];山西医药杂志;1976年04期

9 贾耀华;临床应用碳酸氢钠治疗严重哮喘持续状态[J];陕西医学杂志;1979年01期

10 李凌艺;孔庆平;;甘草浸膏治疗二例支气管哮喘[J];人民军医;1959年02期

相关会议论文 前10条

1 李建真;;平喘通肺胶囊治疗支气管哮喘临床观察[A];甘肃省中医药学会2010年会员代表大会暨学术年会论文汇编[C];2010年

2 周珍文;刘玉琳;刘志刚;王若源;王华;;IL-4、IL-10与支气管哮喘的相关性研究[A];第一届全国变态反应学术研讨会论文汇编[C];2001年

3 潘迅;;支气管哮喘猝死一例[A];中国法医学会全国第十次法医临床学学术研讨会论文集[C];2007年

4 刘忠达;张尊敬;;支气管哮喘的中医药研究进展[A];第十次全国中西医结合防治呼吸系统疾病学术研讨会论文集[C];2009年

5 安会文;安春峰;;中医蜂疗治愈支气管哮喘临床报告[A];首届全国中医蜂疗临床技术推广暨学术研讨会论文集[C];2009年

6 马脑武;;藏药并用艾灸治疗支气管哮喘10例疗效观察[A];中国民族医药学会首届研讨会论文汇编[C];1996年

7 王秀媚;;支气管哮喘治疗中的心理护理[A];全国内科护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2002年

8 李爱芳;吴晓红;;支气管哮喘的心理状况调查[A];2004医学心理、军事心理、康复心理、医学心理教育学术研讨会论文汇编[C];2004年

9 卞金玲;马春燕;宋秋珍;高淑红;赵红;;刺络拔罐治疗支气管哮喘1400例临床观察[A];第二届全国刺络疗法暨首届少数民族放血疗法学术研讨会论文集[C];2005年

10 黎明全;;支气管哮喘与自身免疫[A];第一届全国变态反应学术研讨会论文汇编[C];2001年

相关重要报纸文章 前10条

1 唐语;对支气管哮喘不利的药物[N];农村医药报（汉）;2009年

2 本报记者 曾令浩;支气管哮喘的“有期索型”[N];医药经济报;2011年

3 蔡晓刚;支气管哮喘一针治[N];农村医药报（汉）;2009年

4 ;支气管哮喘常识[N];上海中医药报;2009年

5 副主任药师 王秋冬;甘草致支气管哮喘一例[N];医药经济报;2010年

6 晓青;支气管哮喘的护理[N];农村医药报（汉）;2008年

7 北京中医药大学第三附属医院 崔红生;支气管哮喘诊治思路与方法[N];中国中医药报;2009年

8 王振岭;治疗支气管哮喘方药“咳喘宁”通过鉴定[N];中国医药报;2009年

9 晓鱼;支气管哮喘护理[N];医药经济报;2010年

10 李娜;支气管哮喘的诱发因素[N];农村医药报（汉）;2009年

相关博士学位论文 前10条

1 韩波;反义HIF-1α基因转染提高口腔癌放疗敏感性的相关基础研究[D];四川大学;2005年

2 赵启忠;Survivin反义寡核苷酸（SAO）对Bcl-2、Bax表达的影响及相关性[D];中国医科大学;2005年

3 罗渝昆;超声联合脂质体微气泡介导反义寡核苷酸转染的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年

4 樊平申;角蛋白及IL-20在银屑病动物模型中的分子机制研究及反义寡核苷酸基因治疗[D];第四军医大学;2001年

5 吴军;脂质体介导的cFLIP反义基因治疗人肺腺癌细胞的实验研究[D];中国医科大学;2005年

6 徐爱民;载VEGF反义寡核苷酸纳米粒抑制大鼠肝癌新生血管作用的实验研究[D];第二军医大学;2004年

7 杨静;抗乙型肝炎病毒药物靶标的筛选和验证[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

8 甘华田;溃疡性结肠炎患者肠粘膜NF-κB的活化及其与细胞因子基因表达的关系[D];中国协和医科大学;2001年

9 陈志涛;乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人肺癌细胞A549侵袭力抑制作用的实验研究[D];山东大学;2011年

10 汪滋民;反义抑制增生性瘢痕TGFβ_1和TIMP-1的实验研究[D];第二军医大学;2003年

相关硕士学位论文 前10条

1 赵鹰;STAT6反义寡核苷酸对哮喘小鼠脾淋巴细胞影响作用的研究[D];山西医科大学;2005年

2 吴晓琴;IL-4受体α链基因多态性与支气管哮喘相关性的研究[D];暨南大学;2003年

3 王金东;舍曲林辅助治疗伴有抑郁的青少年支气管哮喘的疗效及血清IL-4变化的研究[D];山东大学;2010年

4 殷楚芬;马凤彬主任医师治疗支气管哮喘临证经验整理[D];广州中医药大学;2011年

5 陈涛;遵义市支气管哮喘患儿过敏原皮肤点刺试验检测结果分析[D];遵义医学院;2010年

6 侯长春;促炎症细胞因子HMGB1在支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病表达变化和临床意义[D];南方医科大学;2010年

7 王娇;麻黄水提物雾化吸入对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响[D];泸州医学院;2011年

8 高丹;支气管哮喘的临床经络诊察研究[D];北京中医药大学;2011年

9 王泽宇;CCL1-CCR8在小鼠支气管哮喘发病机制中的作用及地塞米松对其作用的影响[D];郑州大学;2010年

10 齐双辉;小儿哮咳喘胶囊调节支气管哮喘免疫平衡的实验研究[D];长春中医药大学;2010年

，

本文编号：2691888