组蛋白去乙酰化酶1、8在肺泡Ⅱ型上皮细胞间质转化中的表达及意义

发布时间：2017-03-26 19:16

  本文关键词：组蛋白去乙酰化酶1、8在肺泡Ⅱ型上皮细胞间质转化中的表达及意义，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：【背景与目的】随着近年来人们平均寿命的延长以及治疗肿瘤过程中放化疗的应用，肺间质弥漫性纤维化的发病率逐年上升。临床上传统的治疗药物对于阻抑纤维化的进展虽有一定疗效，但副作用大，应用受限。与其他器官纤维化一样，肺纤维化（Pulmonary fibrosis，PF）涉及到细胞、细胞因子、上皮细胞间质转化（Epithelial-Mesenchymal Transition，EMT）等的共同参与，其中EMT参与了调控器官纤维化的发生和其它生理病理过程，而组蛋白去乙酰化酶（Histone deacetylase，HDACs）也在这些相关的过程中起着重要作用。HDACs是平衡染色质重塑中组蛋白乙酰转移酶（Histone acetyltransferase，HAT）乙酰化活动的酶类，如果两种酶之间的平衡在特定条件下被破坏，就会导致基因转录的失调及信号转导改变，从而引起基因表达异常，这种异常在纤维化以及癌症的发生和发展中都起着重要作用。HDACs共分为四类，，其中HDAC1、8属于Ⅰ类HDAC。近年来的研究表明，HDAC1在TGF-β1诱导的肝细胞EMT过程中发挥重要作用，而且组蛋白去乙酰化酶抑制剂（Histone deacetylase inhibitor，HDACi）-TrichostatinA（TSA）可以有效抑制Ⅰ类及Ⅱ类HDAC，在四氯化碳诱导的慢性肝损伤中预防纤维化，改善心肌纤维化，还可以抑制肾小管上皮细胞EMT及减轻皮肤癌放疗后的纤维化。但是HDACs是否参与了肺泡上皮细胞EMT进程目前尚不清楚，所以本研究通过在体外培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞中加入TGF-β1，观察HDAC1、8和E-cad、α-SMA的表达情况，然后加入TSA，观察其对TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞EMT的影响，探讨HDAC1、8在肺泡上皮细胞EMT过程中的作用及其机制。 【材料与方法】将TGF-β1加入到体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系（RLE-6TN）中，并于不同时间收取细胞，采用Real-time RT-PCR及Western Blot检测HDAC1、HDAC8、上皮细胞特异性标志物（E-cad）及间质细胞特异性标志物（α-SMA）的表达情况。然后将TGF-β1加入经过TSA预处理的细胞中，于不同时间收取细胞，采用Real-time RT-PCR及Western Blot检测E-cad、α-SMA及HDAC1、8的表达情况。 【结果】与对照组相比，加入TGF-β1后，E-cad mRNA的表达下调，α-SMA及HDAC8的mRNA均于12h表达上调，6h、24h表达下调， HDAC1mRNA的表达于6h下调，24h上调；E-cad蛋白表达下调，α-SMA、HDAC1及HDAC8蛋白表达上调。与单用TGF-β1组相比，加入TSA后，E-cad mRNA的表达上调，α-SMAmRNA的表达于6h、12h上调，24h下调，HDAC1mRNA表达下调，HDAC8mRNA表达上调；E-cad蛋白表达上调，α-SMA、HDAC1及HDAC8蛋白的表达均下调。 【结论】1. HDAC1参与了TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞间质转变过程；2.TGF-β1体外诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞EMT，可以通过应用TSA抑制其获得α-SMA表型、失去E-cad表型，从而部分逆转TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞EMT。
【关键词】：肺泡Ⅱ型上皮细胞 EMT HDAC1 TGF-β1 TSA
【学位授予单位】：大理学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R563.9
【目录】：

• 英文缩略语注释4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-18
• 一. 材料11-13
• 1. 主要试剂11-12
• 2. 引物12
• 3. 主要仪器和设备12
• 4. 所用细胞株12-13
• 二. 方法13-18
• 1. 大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系 RLE-6TN 的培养与鉴定13
• 2. TGF-β1 对 HDAC1.8 及 EMT 相关标记物的表达情况13-16
• 3. TSA 对 TGF-β1 诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞 EMT 的影响16-18
• 4. 定量和统计学处理18
• 结果18-27
• 1. 大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系 RLE-6TN 的培养与鉴定18
• 2. TGF-β1 对 HDAC1.8 及 EMT 相关标记物的表达情况18-23
• 3. TSA 对 TGF-β1 诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞 EMT 的影响23-27
• 讨论27-29
• 结论29-30
• 参考文献30-34
• 附录34-35
• 文献综述35-44
• 参考文献41-44
• 致谢44

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 徐国萍;高不郎;姜巍;许祖德;;TGF-β1与EGF对肺泡Ⅱ型上皮细胞表型及功能的影响[J];大理学院学报;2011年06期

2 夏靖;冯冰虹;;组蛋白去乙酰化酶(HDACs)的研究进展[J];广东药学院学报;2010年05期

3 张敏,吴壮,徐军;损伤气道上皮组织转化在气道重塑中的作用[J];医学研究生学报;2004年11期

4 张锦生;;蛋白质乙酰化与肺癌及肺纤维化[J];复旦学报(医学版);2011年04期

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本文编号：269258