TLR4在慢性支气管炎大鼠气道炎症和气道粘液高分泌中的作用

发布时间：2020-06-08 14:07

【摘要】： 第一部分慢性支气管炎大鼠气道炎症和气道粘液高分泌的改变 目的观察慢性支气管炎大鼠气道炎症和气道粘液高分泌的改变。方法清洁级Wistar大鼠18只随机分为2组:正常对照组(NS组)6只和慢性支气管炎组(LPS组)12只。通过检测LPS组大鼠气管注入脂多糖(LPS)200μg/200μl后支气管肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞总数和白细胞分类计数,采用ELISA检测BALF中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,用阿尔辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色气道杯状细胞,免疫组织化学检测肺组织中粘蛋白5ac(Muc5ac)的表达及荧光定量RT-PCR检测Muc5ac mRNA在肺内的表达。结果慢性支气管炎组大鼠BALF中的炎症细胞总数、中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞分类,TNF-α水平,AB-PAS阳染面积,气道Muc5ac蛋白和mRNA表达明显高于正常对照组大鼠(P＜0.01或P＜0.05)。结论慢性支气管炎大鼠出现以中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞为主的慢性气道炎症,并出现气道粘液高分泌改变,且与气道炎症关系密切。 第二部分TLR4在慢性支气管炎大鼠气道炎症和气道粘液高分泌中的作用及多粘菌素B干预的影响 目的观察TLR4在慢性支气管炎大鼠气道炎症和气道粘液高分泌中的作用及多粘菌素B干预的影响,并探讨其可能的机制。方法清洁级Wistar大鼠42只随机分为5组:正常对照组(NS组)6只,慢性支气管炎组(LPS组)12只,多粘菌素B干预组(LPS+PMB组)10只,多粘菌素B自身对照组(PMB组)8只,地塞米松干预组(LPS+DEX组)6只。测定BALF中炎症细胞总数和白细胞分类计数,TNF-α含量,AB-PAS对气道杯状细胞进行染色,用免疫组织化学法检测气道Muc5ac和肺组织TLR2、TLR4蛋白的表达及荧光定量RT-PCR检测Muc5ac mRNA、TLR4 mRNA在肺内的表达。结果LPS组在BALF细胞总计数、中性粒细胞、TNF-α含量,及AB-PAS阳染面积、粘蛋白Muc5ac、TLR2蛋白、TLR4蛋白及Muc5ac mRNA、TLR4 mRNA表达与LPS+PMB组、LPS+DEX组比较差异有显著性(P＜0.01或P＜0.05),NS组和PMB组在上述指标则组间差异无统计学意义(P＞0.05)。结论TLR4可能介导慢性支气管炎大鼠的慢性气道炎症反应和导致气道粘蛋白基因Muc5ac mRNA的高表达和粘蛋白Muc5ac的高分泌。多粘菌素B可能通过抑制肺组织TLR4 mRNA及其蛋白的表达而抑制气道炎症和气道粘液高分泌。
【图文】：

滑肌束断裂，排列紊乱，管腔狭窄(见附图2，3)。3.大鼠BALF细胞计数及白细胞分类两组大鼠BALF细胞总数和白细胞分类结果(见表1，图1)显示:NS组大鼠BALF中主要以巨噬细胞为主。LPS组BALF细胞总数、中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞均较NS组明显增多(P均<0.01)，尤其以中性粒细胞和淋巴细胞增多较明显。LPS组肺泡巨噬细胞所占构成比较NS组显著降低。

图2两组大鼠BALF中TNF一Q变化5.气道AB.PAS染色AB一PAS染色结果显示(见表3，图3):NS组大鼠支气管见到极少量杯状细胞存在，即使是气管也只是少量见到(见附图7)。LPS组大鼠气道可见到大量杯状细胞增生，并可见到粘液分泌(被染成蓝色)，LPS组气道粘液物质相对着色面积较NS组明显增高(六0.0一)，(见附图8)。表3两组大鼠气道AB一队S阳性着色面积的变化(x士:)组别气道AB一队S阳性相对着色面积(%)NS组 1.54士0.12LPS组28.20士1.22*注:与NS组比较，，*P<0.ol。盅圈3530252015l0502习狈主性国翻岛吵己l视犷里粘液物质注:与NS组比较，一尸<0.0，图3两组大鼠气道AB一PAS阳性着色面积的变化
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R562.25

【参考文献】

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本文编号：2703198