IL-19对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERK通道活性的影响

发布时间：2020-06-13 02:05

【摘要】：目的探讨IL-19对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖及ASMCs上ERK1/2 mRNA、p-ERK1/2表达水平的影响。方法健康雄性Wistar大鼠20只,体重均约250g,适应性喂养1周后,分为两组。通过对大鼠进行雾化卵清蛋白,制备哮喘模型大鼠。提取哮喘大鼠ASMCs进行培养,分别以1μg/L、10μg/L、100μg/L IL-19干预ASMCs生长。哮喘模型建立后实验分为两部分: 1.探讨IL-19对哮喘大鼠ASMCs增殖的作用。取大鼠气道平滑肌细胞进行原代培养,均以1μg/L、10μg/L、100μg/L IL-19干预ASMCs生长,实验分为5组:(1)对照组、(2)哮喘组、(3)、(4)、(5)组分别为不同浓度的IL-19干预组。采用流式细胞仪、四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组ASMCs增殖情况,观察不同浓度IL-19对ASMCs增殖的影响。 2.探讨IL-19对哮喘大鼠ASMCsERK信号传导通路活性的影响。实验分组同第一部分。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测ASMCs上ERK1/2 mRNA表达,免疫细胞化学染色法检测磷酸化ERK1/2 (p-ERK1/2)蛋白的表达及定位。 结果 1.与正常鼠相比,慢性哮喘大鼠ASMCs增殖明显,处于S期的细胞比例、A值明显增高。经10μg/L、100μg/L IL-19干预后,慢性哮喘大鼠ASMCs处于S期的细胞比例减少,A值亦降低。且两组间比较有明显差异。而经1μg/L IL-19干预后,慢性哮喘大鼠ASMCs处于S期的细胞比例及A值均无明显变化。 2.与正常对照组ASMCs比较,哮喘组ERK mRNA、ERK1/2蛋白、p-ERK1/2蛋白的表达量显著增高。经10μg/L、100μg/L IL-19干预之后,上述指标较哮喘组均显著降低,且两组间具有统计学差异,但仍高于正常对照组。但经1μg/L IL-19干预之后,ASMCs的ERKmRNA、p-ERK1/2蛋白的表达量与哮喘组比较,无统计学差异。 结论 1.一定浓度的IL-19可以抑制慢性哮喘大鼠ASMCs的增殖、下调慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞上ERK1/2 mRNA及p-ERK1/2表达。提示IL-19可能是通过调节ERK基因的转录及其蛋白的表达而改变ERK通道的活性进而对气道平滑肌细胞的增殖进行调控。
【图文】：

图1 气道壁HE染色法 (250×)Fig.1 The airway HE(250×)图2 大鼠气道平滑肌细胞生长形态(100×)Fig.2 Growth form of rat’s ASMCs(100×)图3 大鼠气道平滑肌细胞α-actin 免疫细胞化学染色 (400×)Fig.3 immunocytochemical staining of α-actin in ASMCs (400×)

图2 大鼠气道平滑肌细胞生长形态(100×)Fig.2 Growth form of rat’s ASMCs(100×)图3 大鼠气道平滑肌细胞α-actin 免疫细胞化学染色 (400×)Fig.3 immunocytochemical staining of α-actin in ASMCs (400×)
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R562.25

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本文编号：2710463