香烟烟雾上调大鼠肺组织和RLE-6TN细胞D4-GDI表达

发布时间：2017-03-28 03:09

  本文关键词：香烟烟雾上调大鼠肺组织和RLE-6TN细胞D4-GDI表达，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：【目的】检测D4-GDI在被动吸烟大鼠肺组织以及CSE处理的RLE-6TN细胞的表达水平变化，从而初步探索D4-GDI是否参与了吸烟相关性COPD的发病机制。 【方法】 1.动物实验部分：取40只雄性SD大鼠，按随机原则分成4组，每组10只，按照本实验室传统方法复制被动吸烟大鼠模型，检测肺功能，收集对照组、被动吸烟2个月组、被动吸烟4个月组、被动吸烟4个月戒烟1个月组(戒烟组)大鼠的肺组织标本，HE染色观察肺组织结构，用免疫组织化学、反转录-PCR（RT-PCR）、Western blot方法检测D4-GDI的表达水平。 2.细胞实验部分：用香烟提取物处理RLE-6TN(大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞)0h、3h、6h、12h、24h，用免疫荧光细胞化学、反转录-PCR（RT-PCR）、Western blot方法检测D4-GDI的表达水平。 【结果】 1.动物实验部分：HE染色示对照组肺组织结构无明显破坏，吸烟2个月组肺泡壁完整性受损，吸烟4个月组肺组织结构破坏最明显，戒烟组肺组织结构破坏稍有好转，但较吸烟4个月组无明显变化。RT-PCR结果显示D4-GDI表达最弱的为对照组(1.21±0.06)，接下来是吸烟2个月组（2.09±0.07），吸烟4个月组D4-GDI表达最强（2.45±0.12），戒烟组(1.84±0.05)较吸烟2个月组、吸烟4个月组表达减少但仍强于对照组，各组间两两比较，均有统计学意义，P均0.05。Western blot趋势同RT-PCR结果，从弱到强分别为（0.30±0.06、0.79±0.15、1.03±0.06、1.46±0.11），各组间两两比较，均有统计学意义，P均0.05。免疫组织化学染色结果显示D4-GDI广泛表达于除支气管上皮细胞以外的各种肺组织细胞，4组间的表达强度变化趋势为表达最弱的为对照组，其次是吸烟2个月组，吸烟4个月组D4-GDI表达最强，戒烟组较吸烟2个月组、吸烟4个月组表达减少但仍强于对照组，变化趋势同Western blot结果一致。 2.细胞实验部分：RT-PCR结果显示10%CSE处理不同时间，随着CSE处理时间的延长，D4-GDI的mRNA表达在0h组、3h组为（0.31±0.01、0.40±0.02），在12h组（0.69±0.05）最高，24h组（0.60±0.03）低于12h组但仍高于6h组（0.52±0.04），不同时间点组之间两两比较，均有统计学意义，P均0.05，Western blot结果显示10%CSE处理不同时间，随着CSE处理时间的延长，D4-GDI的表达逐渐增高，分别为（0.44±0.06、0.78±0.08、1.11±0.12、1.37±0.07、1.65±0.13），在24h组最高，不同时间点组之间两两比较，均有统计学意义，P均0.05，免疫荧光细胞化学染色检测结果与Western blot结果一致。 【结论】 吸烟导致D4-GDI在肺组织和RLE-6TN中表达增高，D4-GDI可能参与了吸烟相关性COPD的发病机制。
【关键词】：香烟烟雾提取物 D4-鸟苷酸解离抑制因子 Rho 细胞增殖 慢性阻塞性肺疾病
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R563
【目录】：

• 主要缩略词4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-18
• 结果18-21
• 讨论21-24
• 结论24-25
• 参考文献25-28
• 附图28-32
• 综述；D4-鸟苷酸解离抑制因子在肺癌发病机制中的研究进展32-42
• 参考文献38-42
• 硕士期间撰写论文42-43
• 致谢43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 欧阳卿;胡瑞成;戴爱国;谭双香;肖志强;汤参娥;;吸烟对肺组织D4-GDI表达的影响及其与慢性阻塞性肺疾病相关性的蛋白质组学研究[J];生物化学与生物物理进展;2010年11期

2 陈玉霞;刁飞;;Rho GTP酶参与肿瘤调控的下游效应蛋白[J];生命的化学;2006年03期

3 曹文枫;孙保存;;Rho蛋白与细胞骨架调节的细胞运动[J];中国肿瘤临床;2009年14期

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本文编号：271578