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机械通气对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的影响

发布时间:2020-07-03 06:45
【摘要】: 目的:研究不同潮气量和呼气末正压(PEEP)机械通气对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的影响。 方法:40只健康SD大鼠随机分为5组(n=8),⑴小潮气量组(LV组):潮气量8ml/kg,不加PEEP;⑵大潮气量组:潮气量30ml/kg,不加PEEP;⑶小潮气量+2PEEP组(LV2P组):潮气量8ml/kg,同时给PEEP 2cmH2O;⑷小潮气量+5PEEP组(LV5P组):潮气量8ml/kg,同时给PEEP 5cmH2O;⑸小潮气量+8PEEP组(LV8P组):潮气量8ml/kg,同时给PEEP 8cmH2O。经颈静脉注射油酸0.1ml/kg复制急性肺损伤模型成功,随即进行机械通气。通气2h后处死动物,取血及全肺称湿重,计算肺系数(肺湿重/体重×100)来比较肺水肿的程度;取支气管肺泡灌洗液(BALF),测定BALF中肿瘤坏死因子的浓度;用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的末端转移法(TUNEL)检测肺组织中细胞凋亡指数;采用免疫组织化学技术检测肺组织caspase-3蛋白酶的表达和分布。 结果: 1潮气量的增加使肺脏充血明显,肺组织结构紊乱,有肺不张,多量炎性细胞浸润,肺泡腔内有红色的渗出,微血管内有血栓形成;加用PEEP后病变明显减轻。 2肺系数的变化:各组肺系数相比,HV组明显高于LV组(p0.01);小潮气量组加用PEEP各组中,LV2P和LV8P组明显高于加LV5P组(p0.01),而这两组间相比无显著差异(p0.05)。 3血清和支气管肺泡灌洗液中TNF-α的变化: 3.1血清TNF-α浓度变化:HV组明显高于LV组(p0.01),小潮气量组加用PEEP各组中,LV2P组明显高于LV5P和LV8P组(p0.01),后两组比较组无显著性差异(p0.05)。 3.2支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度变化:HV组明显高于LV组(p0.01),小潮气量组加用PEEP各组中,LV8P组明显高于LV2P组和LV5P组(p0.01),而后两组间比较无显著性差异(p0.05)。 4 TUNEL分析结果:随着潮气量的增加,肺组织细胞凋亡指数增加,凋亡细胞主要分布在肺泡间隔和支气管上皮;加用PEEP后,凋亡细胞减少,以LV5P组凋亡细胞最少,与LV、LV2P、LV8P组比较有统计学意义(p0.01)。 5 caspase-3蛋白的表达:随着潮气量的增加,caspase-3蛋白的阳性表达明显增加,以支气管上皮表达增强最为显著。LV、LV2P、LV8P组阳性细胞较少,主要在血管内皮和细支气管上皮,三组无统计学差异(p0.05);而LV5P组表达最少,与前三组相比有统计学差异(p0.01)。 结论: 1大潮气量机械通气加重了ALI大鼠的肺损伤,小潮气量加用PEEP对肺有保护作用。 2大潮气量明显增加肺组织细胞凋亡的数目和caspase-3蛋白酶的表达,小潮气量及加用PEEP组凋亡细胞的数目明显减少,且分布不同。 3 TUNEL检测凋亡细胞与免疫组化法caspase-3蛋白的阳性表达分布不完全相同,表明在ALI模型VILI的发病机制中有关细胞凋亡是否存在其他的途径及调控基因值得进一步研究。
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R563.8

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