人工合成TREM-1多肽对脓胸大鼠炎症反应的干预效应

发布时间：2020-07-04 15:22

【摘要】： 目的髓系细胞触发受体-1 (Triggering receptor expressed on myeloid cells-1, TREM-1)是一种存在于人及啮齿类动物的多形核中性粒细胞及成熟单核的细胞表面分子。在微生物成分存在的情况下,TREM-1的活化可放大炎症反应,并可引起败血症及肺炎初期的过度反应。本次研究的目的是探讨用TREM-1细胞外部分的人工合成多肽类似物对化脓性胸膜炎的大鼠炎症反应的干预效应。 方法对雄性Wistar大鼠进行胸腔穿刺注射铜绿假单胞菌(PAO1 strain)与金黄色葡萄球菌(ATCC 25923),建立化脓性胸膜炎的大鼠模型,对其行随机分组进行或不进行TREM-1源性的合成多肽类似物干预,然后分别在注射后6h、12h、18h、24h采集大鼠胸水、血清、胸膜标本进行研究,并观察各组8天生存率情况。将大鼠随机分为:(1)单纯脓胸组(n = 24),单纯胸穿注射铜绿假单胞菌与金黄色葡萄球菌混合悬液;(2)对照组(n = 44),在胸穿注入对照多肽1mL溶液(1mg/mL)后马上注射铜绿假单胞菌与金黄色葡萄球菌混合悬液;(3) LP17组(n = 44)在胸穿注入LP17多肽1mL溶液(1mg/mL)后马上注射铜绿假单胞菌与金黄色葡萄球菌混合悬液;(4)空白组(n = 20),我们分别在胸穿后第6 h、12 h、18 h、24 h 4个时间点分批处死大鼠(单纯脓胸组[n= 24]、对照组[n = 24]和LP17组[n = 24],每组每个时间点处死6例)。处死后开胸收集胸水及胸膜组织病理标本,并进行胸水细胞计数,胸水及血清标本的TNF-α、IL-1β、IL-6浓度测定。剩下对照组(n = 20)、LP17组(n = 20)和空白组(n = 20)用于8天内生存率测定。使用细胞计数板测出总胸水细胞数。胸水细胞涂片予瑞氏染色,并根据细胞形态进行手工细胞分类。用ELISA法进行血清与胸水中IL-1β的浓度测定。将胸水细胞用CD11b/CD18单克隆抗体或空白对照抗体标记后,使用流式细胞术测定胸水细胞表面的CR3 (CD11b/CD18)的表达。将脏层、壁层胸膜标本使用HE染色进行组织病理学分析。 结果与对照组和单纯脓胸组相比,LP17组在时间点18 h和24 h可降低总胸水细胞数和中性粒细胞数(P 0.05)。在时间点18 h、24 h,LP17的胸水IL-1β浓度低于对照组、单纯脓胸组(P 0.05)。但LP17不影响胸水细胞的比例,及中性粒细胞的CR3 (CD11b/CD18)的表达(P 0.05)。组织病理学研究发现单纯脓胸组和对照组的胸膜出现了严重的损伤(蛋白渗出、白细胞浸润),但LP17干预可明显减轻炎症程度。对照组(n=20)、LP17组(n=20)、空白组(n=20)胸穿注射铜绿假单胞菌与金黄色葡萄球菌混合悬液后8天的生存情况显示LP17组生存率达40%,而对照组生存率仅有15% (P 0.05),空白组没有大鼠死亡。 结论铜绿假单胞菌与金黄色葡萄球菌在24 h内导致大鼠发生严重的化脓性胸膜炎。在脓胸大鼠中,LP17的干预可减少胸水细胞总数与中性粒细胞数、降低胸水炎症因子IL-1β的浓度、明显减轻大鼠胸膜炎症反应程度并改善其生存率。对于化脓性胸膜炎的大鼠,通过使用合成多肽LP17调节TREM-1信号通路,可明显减轻脓胸大鼠的炎症反应程度并改善其生存率。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R561
【图文】：

胸水细胞计数分类

*在时间点18h.24h,LP17的胸水IL-邓浓度低于对照组、单纯脓胸组(P<0.05),提示LP17干预可减轻脓胸大鼠的局部炎症反应.

【引证文献】

相关期刊论文 前1条

1 周丹;;Trem-1在炎症反应中的作用机理研究[J];河北医学;2011年06期

本文编号：2741250